細(xì)胞:H2347細(xì)胞
中文名稱:人肺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性:貼壁細(xì)胞
H2347細(xì)胞培養(yǎng)基:1640 培養(yǎng)基 血清:10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS 緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶,加 6~8ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況,定期換液(每周 2-3 次),待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
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為了檢驗(yàn)成體干細(xì)胞和體細(xì)胞的克隆潛力,科研人員采用了造血干細(xì)胞和處于不同分化階段的體細(xì)胞進(jìn)行克隆實(shí)驗(yàn)。
結(jié)果顯示,即使是已經(jīng)分化的體細(xì)胞,如造血細(xì)胞中的粒細(xì)胞,也完整地保留了形成個(gè)體的所有遺傳信息,可以支持胚胎發(fā)育成為個(gè)體,而且成功率甚至遠(yuǎn)高于分化程度較低的細(xì)胞。 (RBL-1細(xì)胞 白血病細(xì)胞 種屬:大鼠)(PG-LH7細(xì)胞 肺巨細(xì)胞 種屬:人)
新近用一種成熟的體細(xì)胞——粒細(xì)胞克隆出小鼠,使用處于分化狀態(tài)的體細(xì)胞培育出哺乳動(dòng)物。研究證明體細(xì)胞的克隆潛力比成體干細(xì)胞更大,并為克隆羊多利身份的真實(shí)性提供了進(jìn)一步依據(jù)。 (SH2細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 種屬:小鼠)(SH3細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 種屬:小鼠)
干細(xì)胞是尚未成熟的細(xì)胞,具有分化形成其他細(xì)胞和組織器官的潛能,有望用于治療多種疾病。胚胎干細(xì)胞分化能力,而成年動(dòng)物體內(nèi)的干細(xì)胞即成體干細(xì)胞通常只能發(fā)展成特定種類的體細(xì)胞,比如造血干細(xì)胞發(fā)展成血液細(xì)胞。 成體干細(xì)胞具有一定的分化潛力,用它來(lái)克隆動(dòng)物比使用分化后的體細(xì)胞效率更高。(SRA01/04細(xì)胞 晶體上皮細(xì)胞 種屬:人)