細(xì)胞：Daoy細(xì)胞
中文名稱：人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
Daoy細(xì)胞培養(yǎng)基：MEM+10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通常控制在 1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
GBM是原發(fā)性腦腫瘤中最常見且致死率高的惡性腫瘤。
膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(GSC)是存在于GBM中的一種具有強(qiáng)致瘤性的細(xì)胞類群，通常認(rèn)為GSC介導(dǎo)了GBM的細(xì)胞異質(zhì)性、耐藥性和預(yù)后不良。
抑癌基因PTEN的功能失活是GBM中最常見的遺傳改變之一，靶向敲除PTEN基因選擇性誘發(fā)人神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)生致瘤性轉(zhuǎn)化，而間充質(zhì)干細(xì)胞則表現(xiàn)為加速衰老。
PTEN缺失的神經(jīng)干細(xì)胞表現(xiàn)出腫瘤相關(guān)的代謝和基因表達(dá)譜改變，且獲得了在免疫缺陷小鼠顱內(nèi)形成腫瘤的能力。另一個(gè)抑癌基因p53的缺乏可明顯增強(qiáng)PTEN缺失的神經(jīng)干細(xì)胞的致瘤性。
研究還發(fā)現(xiàn)，PAX7與PTEN的表達(dá)水平在膠質(zhì)瘤臨床大數(shù)據(jù)庫中呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性，進(jìn)一步確定了PTEN-PAX7通路在神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)病過程中的關(guān)鍵作用。
臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，霉素C能夠選擇性誘導(dǎo)PTEN缺失的神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)生凋亡，揭示了未來用于PTEN突變型神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤精準(zhǔn)治療的一種可能方案。
發(fā)現(xiàn)了PTEN保護(hù)人神經(jīng)干細(xì)胞的一種新機(jī)制，并建立了新型的人類神經(jīng)干細(xì)胞研究平臺，以便系統(tǒng)精確地分析各類促使人神經(jīng)干細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的因素。該研究有望為神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的精準(zhǔn)治療提供新靶點(diǎn)和思路。
