細(xì)胞：Calu-1細(xì)胞
中文名稱：人肺癌細(xì)胞
生長特性：貼壁細(xì)胞
Calu-1細(xì)胞培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基 血清：10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件：50%基礎(chǔ)培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
Calu-1細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程( 請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作)
1. 吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS 緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加 2-3 ml 0.25% yi酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?1-2min)
2. 鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉yi酶，加 6~8ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散。
3. 取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4. 注意培養(yǎng)基 PH 值變化情況，定期換液(每周 2-3 次)，待細(xì)胞密度達(dá)到 80%以后重復(fù) 1 項(xiàng)操作或凍存。
(網(wǎng)絡(luò)信息主針對(duì)網(wǎng)絡(luò)推廣作用，僅供參考，細(xì)胞培養(yǎng)請(qǐng)咨詢細(xì)胞庫管理員，以細(xì)胞庫管理員提供給您的信息為準(zhǔn)，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細(xì)胞庫管理員，避免不必要的損失；)
腦是一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)。在胚胎發(fā)育過程中，大量的神經(jīng)細(xì)胞是依靠什么樣的機(jī)制來協(xié)調(diào)它們的運(yùn)動(dòng)遷移并排列組合成有序的組織結(jié)構(gòu)，一直吸引著研究者們濃厚的興趣。
發(fā)現(xiàn)高度極性的神經(jīng)細(xì)胞在定向遷移過程中，需要一種長距離的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳遞過程，協(xié)調(diào)神經(jīng)細(xì)胞的不同部位對(duì)外界導(dǎo)向信號(hào)的反應(yīng)。(CCLP1細(xì)胞培養(yǎng)條件：90%高糖DMEM、10%胎牛血清、貼壁細(xì)胞)
他們觀察到，遷移神經(jīng)細(xì)胞前方的生長錐是前方信號(hào)的部位，在自發(fā)遷移的神經(jīng)細(xì)胞前方遭遇排斥性的神經(jīng)導(dǎo)向因子Slit時(shí)會(huì)發(fā)生顯著的躲避反應(yīng)——生長錐首先 “撤退”，然后胞體停止前進(jìn)，并調(diào)轉(zhuǎn)方向，最終細(xì)胞朝相反方向逃逸而去。
在這個(gè)過程中，會(huì)發(fā)生一個(gè)長距離的細(xì)胞內(nèi)鈣波“通訊”，首先是Slit在生長錐內(nèi)“點(diǎn)燃”鈣離子“烽火”，緊接著是鈣離子“烽火”從生長錐傳遞到后方的胞體，通知胞體前方的“敵情”，進(jìn)而通過調(diào)節(jié)胞體部位的一種小分子GTP酶RhoA的活性和分布，使細(xì)胞體掉頭向后“撤退”。(CCRF-CEM細(xì)胞培養(yǎng)條件：90% RIMP1640、Penicillin/Streptomycin、10% 胎牛血清、懸浮細(xì)胞、人急性淋巴細(xì)胞白血病T淋巴細(xì)胞)
正是這個(gè)鈣波信號(hào)協(xié)調(diào)了運(yùn)動(dòng)中的神經(jīng)細(xì)胞各部分對(duì)外界排斥性因子Slit的逃避反應(yīng)。目前已知多種發(fā)育性神經(jīng)系統(tǒng)疾病是由于神經(jīng)細(xì)胞遷移紊亂造成的，患者常表現(xiàn)出智障、癲癇等癥狀。
因此，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞遷移導(dǎo)向基本機(jī)制的研究將有利于人們對(duì)這類發(fā)育性神經(jīng)系統(tǒng)疾病的認(rèn)識(shí)和防治。
