細胞:BHT101細胞
中文名稱:人甲狀腺癌細胞
生長特性:貼壁細胞
BHT101細胞培養(yǎng)基:DMEM-H +10%FBS(GIBCO胎牛血清)
凍存條件:50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO
收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基,或自己配置的新鮮培養(yǎng)基(含15%血清),如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時)。
BHT101細胞傳代:
1):細胞密度約80%時,吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞(注意根據(jù)實際情況,把握消化時間)。
2):鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時;
(可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處,即可肉眼可見細胞層脫落,或吹打后鏡下觀察吹打處,即消化完成,否則繼續(xù)消化)
直接吸掉yi酶,加3~4ml 培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,把細胞層吹落,吹散。
3):取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中,添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4):注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。
(網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用,僅供參考,細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員,以細胞庫管理員提供給您的信息為準,操作前,如果有不明白之處,先咨詢細胞庫管理員,避免不必要的損失;)
馬流感病毒通用型(EIV)核酸擴增檢測
適用標本類型:發(fā)病動物鼻孔膿性分泌物、鼻粘膜試子及尸檢動物肺臟、淋巴結(jié)等組織以及細胞培養(yǎng)液。
標本采集:
1 固體組織:取尸檢動物肺及淋巴結(jié)等組織約1g,置入1.5ml潔凈EP管,立即送檢。
2 體液及病毒培養(yǎng)液:取上述標本約1ml,置入1.5ml潔凈EP管,立即送檢。
3 鼻粘膜試子:用棉試子取鼻粘膜或鼻孔膿性分泌物,將試子放入盛有1.0ml PBS(或生理鹽水)的離心管中,立即送檢。
標本保存和運輸:
上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃,長期保存可置-70℃。但不能超過6個月,標本運送應采用0℃冰壺。
實驗適用儀器:
主要包括ABI GeneAmp PCR System7700、ABI GeneAmp PCR System7500、ABI PRISM 7300、LightCycler等毛細管的儀器,MJ Opticon系列或取得資格認證的定量PCR儀。
質(zhì)控標準:
陰性質(zhì)控品:全部陰性。
EIV陽性質(zhì)控品:陽性質(zhì)控品的 Ct 值均應小于 30,且呈標準S型擴增曲線。
以上條件應同時滿足 ,否則,此次試驗視為無效,全部試驗應重新進行。