細胞：RT-112細胞

中文名稱：人膀胱癌細胞

生長特性：貼壁細胞

RT-112細胞培養(yǎng)基：1640 培養(yǎng)基  血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）

凍存條件：50%基礎培養(yǎng)基、40% FBS、10% DMSO

收到細胞后請盡快更換配套培養(yǎng)基，或自己配置的新鮮培養(yǎng)基（含15%血清），如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時）。

RT-112細胞傳代：

1）：細胞密度約80%時，吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 0.25% yi酶進行消化細胞（注意根據(jù)實際情況，把握消化時間）。

2）：鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時；

（可用吸管吸起些許yi酶輕輕吹打細胞層某處，即可肉眼可見細胞層脫落，或吹打后鏡下觀察吹打處，即消化完成，否則繼續(xù)消化）

直接吸掉yi酶，加3~4ml 培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。

3）：取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿中，添加適當?shù)呐囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4）：注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存。

（網(wǎng)絡信息主針對網(wǎng)絡推廣作用，僅供參考，細胞培養(yǎng)請咨詢細胞庫管理員，以細胞庫管理員提供給您的信息為準，操作前，如果有不明白之處，先咨詢細胞庫管理員，避免不必要的損失；）

雞特定基因序列(Chiken)核酸擴增檢測：

電泳檢測

1 2%瓊脂糖凝膠配制：稀釋50×TAE至1×TAE(取20ml50×TAE，加980 ml雙蒸水至1L),稱4g瓊脂糖放于500mL 錐形瓶中，1×TAE 200 ml，置入微波爐中加熱熔解(避免加熱沸騰溶液外溢)，再加入20μl 溴化乙錠(EB)充分混勻。在電泳槽內(nèi)放好梳子，倒入瓊脂糖凝膠，待凝固后使用。

2 電泳檢測：直接取PCR 擴增產(chǎn)物15μl，用加樣槍點樣于瓊脂糖凝膠孔中，以5V/cm 電壓，1×TAE中電泳，紫外燈下觀察結(jié)果。

雞特定基因序列(Chiken)核酸擴增檢測結(jié)果判斷：

陰性質(zhì)控品無帶出現(xiàn)(引物帶除外)，Chiken -陽性質(zhì)控品出現(xiàn)211bp 擴增帶，若被檢樣品出現(xiàn)211bp 擴增帶為含有雞源性成分，否則為陰性。

【質(zhì)控標準】

陰性質(zhì)控品：沒有目的條帶，全部陰性。

Chiken -陽性質(zhì)控品：出現(xiàn)目的條帶(211bp)。

以上兩個條件應該同時滿足，否則，此次試驗視為無效。