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小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-07-26 11:29:31瀏覽次數(shù):107次

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小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 
貨號(hào):ZK-M5043
規(guī)格: 96T/48T
品牌:子科生物ZIKER
運(yùn)輸:全國(guó)各地快遞免費(fèi)送貨上門(mén),低溫運(yùn)輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運(yùn)輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。

小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng),并通過(guò)酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過(guò)顏色的形式顯現(xiàn)出來(lái)。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無(wú)選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無(wú)關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過(guò)共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候,被檢測(cè)靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測(cè)人員可以裸眼觀察,可以通過(guò)顏色來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過(guò)顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)讀取吸光度值。

實(shí)驗(yàn)測(cè)定具體步驟:
1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目,并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測(cè)時(shí)×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2.將標(biāo)準(zhǔn)品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中,1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對(duì)于血清、體液、 組織勻漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5.將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。(TMB 空白顯色孔除 外)。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次,每次浸泡 1 分鐘左右。 
7.將準(zhǔn)備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入(TMB 空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8. 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次,每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9.按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液,37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 (注意:顯色時(shí)間供參考,因用戶實(shí)驗(yàn)室條件差異,顯色時(shí)間會(huì)有所不同。此時(shí)肉眼可 見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍(lán)色,后 3-4 孔差別不明顯)。 
10.按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液,此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。 
11.用酶標(biāo)儀在 450nm 測(cè)定 OD值。

人短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白2(SPLUNC2) ELISA Kit        96T        48T                    0.156-10ng/mL    0.059ng/mL    human Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 2 (SPLUNC2) ELISA Kit    Homo sapiens human
人短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白3(SPLUNC3) ELISA Kit        96T        48T                    0.156-10ng/mL    0.066ng/mL    human Short Palate, Lung And Nasal Epithelium Carcinoma Associated Protein 3 (SPLUNC3) ELISA Kit    Homo sapiens human
小鼠抑制素βC(INHβC)  ELISA Kit        96T        48T                    78.125-5000pg/mL    28pg/mL    mouse Inhibin Beta C (INHbC) ELISA Kit    Mus musculus  mouse
人銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4) ELISA Kit        96T        48T                    0.313-20ng/mL    0.117ng/mL    human Superoxide Dismutase, Copper Chaperone (SOD4) ELISA Kit    Homo sapiens human
牛胱天蛋白酶3(CASP3) ELISA Kit        96T        48T                    0.156-10ng/mL    0.071ng/mL    Bovine Caspase 3 (CASP3) ELISA Kit    Bos taurus; Bovine  Cattle
大鼠補(bǔ)體受體2(CR2) ELISA Kit        96T        48T                    1.563-100ng/mL    0.57ng/mL    Rat Complement Receptor 2 (CR2) ELISA Kit    Rattus norvegicus  Rat
人細(xì)胞程序性死亡蛋白1(PDCD1) ELISA Kit        96T        48T                    0.156-10ng/mL    0.059ng/mL    human Programmed Cell Death Protein 1 (PDCD1) ELISA Kit    Homo sapiens human
人肌球蛋白重鏈2(MYH2) ELISA Kit        96T        48T                    0.313-20ng/mL    0.136ng/mL    human Myosin Heavy Chain 2, Skeletal Muscle, Adult (MYH2) ELISA Kit    Homo sapiens human
牛B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2) ELISA Kit        96T        48T                    1.563-100ng/mL    0.66ng/mL    Bovine B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit    Bos taurus; Bovine  Cattle
牛甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP) ELISA Kit        96T        48T                    15.625-1000pg/mL    6.5pg/mL    Bovine Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP) ELISA Kit    Bos taurus; Bovine  Cattle
大鼠整合素α2(ITGα2) ELISA Kit        96T        48T                    0.313-20ng/mL    0.109ng/mL    Rat Integrin Alpha 2 (ITGa2) ELISA Kit    Rattus norvegicus  Rat
小鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP3)  ELISA Kit        96T        48T                    62.5-4000pg/mL    26.3pg/mL    mouse Fatty Acid Binding Protein 3, Muscle And Heart (FABP3) ELISA Kit    Mus musculus  mouse
大鼠胞外5'-核苷酸酶(NT5E) ELISA Kit        96T        48T                    0.313-20ng/mL    0.113ng/mL    Rat 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E) ELISA Kit    Rattus norvegicus  Rat
大鼠早老素2(PS2) ELISA Kit        96T        48T                    0.156-10ng/mL    0.059ng/mL    Rat Presenilin 2 (PS2) ELISA Kit    Rattus norvegicus  Rat
牛Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax) ELISA Kit        96T        48T                    0.313-20ng/mL    0.124ng/mL    Bovine Bcl2 Associated X Protein (Bax) ELISA Kit    Bos taurus; Bovine  Cattle
小鼠腺苷酸環(huán)化酶10(ADCY10)  ELISA Kit        96T        48T                    0.313-20ng/mL    0.132ng/mL    mouse Adenylate Cyclase 10, Soluble (ADCY10) ELISA Kit    Mus musculus  mouse

 

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