?產(chǎn)品名稱：兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽（GIP）ELISA試劑盒，兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽（GIP）酶聯(lián)免疫試劑盒，兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽（GIP）ELISA試劑盒說明書，深圳子科生物ELISA試劑盒暑期5折*
?英文名稱：Rabbit Glucose dependent insulin releasing polypeptide,GIP ELISA Kit
?產(chǎn)品規(guī)格：96T（人份）/48T（人份）（單孔檢測分別可以檢測90份樣本，42分樣本，一般都需要留6個孔做標(biāo)準(zhǔn)曲線）。
?檢測方法：酶聯(lián)免疫分析ELISA方法
?有效期： 4 個月(4℃)；8 個月（-20℃）。 
?保存方法： 2-8℃（頻繁使用時）; -20℃（長時間不用時）。 

實(shí)驗說明：
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準(zhǔn)。
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實(shí)驗結(jié)果造成任何影響。

試劑的準(zhǔn)備：
1. 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：
500pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）  原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
250pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
125pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
62.5pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
31.2pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15.6pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）  100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0pg/ml   （空白對照）   原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。
 
試劑盒性能： 
1. 靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
 
操作步驟：
1. 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
 
結(jié)果判斷與分析：
1、 儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的LTB4標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的LTB4含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

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