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大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒●品牌:子科生物ZIKER,美國(guó)R&D,美國(guó)immonoway,美國(guó)sciencell,德國(guó)IBL
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大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒操作步驟
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。
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1、子科生物所提供的試劑產(chǎn)品,均為科研試劑,僅供科研使用,不得用于注射、藥品、食用,血更不能用于臨床檢測(cè)和動(dòng)物防疫檢測(cè)或其他用途,對(duì)此造成的任何利潤(rùn)與損失、間接損失、損害承擔(dān)責(zé)任經(jīng)濟(jì)糾紛,我司不承擔(dān)任何責(zé)任。
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標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
其他相關(guān)產(chǎn)品如下:5142-23-4 3-Methyl-3H-purin-6-amine3-甲基-3H-嘌呤-6-胺
6381-92-6 EDTA Na2 乙二胺四乙酸二鈉
EDTA Na2 乙二胺四乙酸二鈉
EDTA Na2 乙二胺四乙酸二鈉
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60-00-4 EDTA FREE ACID 乙二胺四乙酸
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67-42-5 EGTA 乙二醇-雙-(2-氨基乙基)四乙酸
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1239-45-8 Ethidium Brmide 溴化乙錠
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314-13-6 Evans Blue 埃文斯藍(lán)
Eosin Y 伊紅Y(醇溶)
17372-87-1 Eosin Y 伊紅Y(水溶)
25952-53-8 EDAC 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽
538-75-0 NN'Dicyclohexylcarbodie N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)
9002-98-6 聚乙烯亞胺
518-47-8 Fluorescein Sodium Salt熒光素鈉
75-12-7 Formamide,Deionized 去離子甲酰胺
75-12-7 Formamide 甲酰胺
Freund 's Adjuvant Incomplete 弗氏不*佐劑
Freund 's Adjuvant Complete 弗氏*佐劑
Folin-Phenol 福林酚
Folin-Phenol 福林酚
14726-29-5 Fast Blue RR Salt 固藍(lán)RR鹽
5486-84-0 Fast Blue BB Salt 固藍(lán)BB鹽
2353-45-9 Fast Green FCF 固綠
3326-32-7 FITC 異硫氰酸熒光素
596-09-8 Fluorescein diacetate二乙酸熒光素
9001-32-5 Fibrinogen 纖維蛋白原
Fibrinogen 纖維蛋白原
9001-32-5 Fibrinogen 纖維蛋白原(來(lái)源于牛血漿)
9001-32-5 Fibrinogen 纖維蛋白原(來(lái)源于牛血漿)
Ficoll 400 聚蔗糖400
59-30-3 Folic acid(Vitamin M) (維生素B9) 葉酸
7415-69-2 Guanosine5-Diphosphate (GDP)
36051-31-7 Guanosine5-Tiphosphate (GTP)
G-418 遺傳霉素
108321-42-2 G-418 遺傳霉素
G-418 遺傳霉素
1405-41-0 Gentamycin Sulfate 硫酸慶大霉素
Gentamycin Sulfate 硫酸慶大霉素
70-18-8 L-Glutathione reduced 還原型谷胱甘肽
L-Glutathione reduced 還原型谷胱甘肽
27025-41-8 L-Glutathione,Oxidized 氧化型谷胱甘肽
9001-48-3 Glutathionereductase谷胱甘肽還原酶(來(lái)源于釀酒酵母)