人腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA檢測試劑盒子科生物研發(fā)生產(chǎn),深圳子科生物ELISA試劑盒優(yōu)質(zhì)供應商,擁有10年的研發(fā)和生產(chǎn)經(jīng)驗,擁有*的儀器設(shè)備,專業(yè)的技術(shù)人員和*的實驗技術(shù),目前已經(jīng)建立強大的實驗技術(shù)服務平臺,品牌設(shè)立為:ZIKER 。
●產(chǎn)品名稱:人腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA檢測試劑盒
●英文名稱:human Cerebral Dopamine Neurotrophic Factor (CDNF) ELISA Kit
●貨號:ZK-H2936
●規(guī)格: 96T/48T
●反應時間: 1-5h
●所需樣本體積: 50-100ul
●檢測波長: 450 nm
●用途: For research use only. Not for diagnostic use.
●特點:靈敏性高、特異性強、重復性好
●服務:子科生物所有的elisa試劑盒均可免費代測,全程Elisa實驗技術(shù)指導。
●運輸:全國各地快遞免費送貨上門,低溫運輸,用冰袋加泡沫保溫盒包裝,確保產(chǎn)品運輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。
深圳子科生物自主研發(fā)酶聯(lián)免疫分析檢測試劑盒,品牌為ZIKER,可以檢測Human,Rat、Mouse、Porcine、Sheep、Monkey、Goat、Bovine、Canine、Rabbit、Chicken、Duck、Fish、Plant 等各種樣本,品種齊全,質(zhì)量保證,免費代測、技術(shù)全程支持服務,我公司長期跟各大高校科研實驗室保持課題合作,經(jīng)驗豐富,質(zhì)量穩(wěn)定!我們所有的產(chǎn)品都是我司直接供貨,無中間差價,直接供貨,讓您以*惠的實驗預算完成您的實驗!
人腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA檢測試劑盒實驗原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
人腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA檢測試劑盒標本的稀釋原則:
首先通過文獻檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標準曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準確的。稀釋的過程中,應做好詳細的記錄。zui后計算濃度時,稀釋了“N”倍,標本的濃度應再乘以“N”。
標準品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標準品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
人腦多巴胺神經(jīng)營養(yǎng)因子(CDNF)ELISA檢測試劑盒操作步驟
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。ZK-B7130 牛上皮性鈣黏附蛋白(CDHE) ELISA Kit Bovine Cadherin, Epithelial (CDHE) ELISA Kit ELISA. 96T/48T ZIKER子科生物
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