●產(chǎn)品名稱：人鉤端螺旋體（Leptospira）ELISA檢測試劑盒
●英文名稱：Human Leptospira ELISA kit
●貨號：ZK-H1583
●規(guī)格： 96T/48T
●反應(yīng)時間： 1-5h
●所需樣本體積： 50-100ul
●檢測波長： 450 nm
●用途： For research use only. Not for diagnostic use.
●特點：靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
●服務(wù)：子科生物所有的elisa試劑盒均可免費代測，全程Elisa實驗技術(shù)指導(dǎo)。
●運輸：全國各地快遞免費送貨上門，低溫運輸，用冰袋加泡沫保溫盒包裝，確保產(chǎn)品運輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。

深圳子科生物所有ELISA試劑盒均需要經(jīng)過質(zhì)檢合格后才允許出庫，能有效控制產(chǎn)品質(zhì)量，廣大客戶可以放心購買。且子科生物所有ELISA試劑盒里的抗體均采用進口品牌抗體，能有效保證產(chǎn)品的高效靈敏性，且我公司研發(fā)人員有豐富的研發(fā)經(jīng)驗，*的儀器設(shè)備，*的實驗技術(shù)，讓我公司產(chǎn)品優(yōu)于同等廠家系列產(chǎn)品，是您的*廠家。

人鉤端螺旋體（Leptospira）ELISA檢測試劑盒實驗測定具體步驟：
1．確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目，并增加 1 孔作為 TMB 空白顯色孔。 總數(shù)=樣品數(shù)+9；做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。 
2．將標準品各 0.1ml 依次加入一排 7 孔中，1 孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于血清、體液、 組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清，直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品 100μ ι 。 
3．酶標板加上蓋，37℃反應(yīng) 90 分鐘。 
4．反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體；或甩去酶標板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。 不洗。 
5．將準備好的生物素抗體工作液按每孔 0.1ml 依次加入。（TMB 空白顯色孔除 外）。37℃反應(yīng) 60 分鐘。 
6． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 3 次，每次浸泡 1 分鐘左右。 
7．將準備好的 ABC 工作液按每孔 0.1ml 依次加入（TMB 空白顯色孔除外）。37℃反應(yīng) 30 分鐘。 
8． 0.01M TBS 或 0.01M PBS 洗滌 5 次，每次浸泡 1-2 分鐘左右。 
9．按每孔 90μ ι 依次加入已在 37℃平衡 30 分鐘的 TMB 顯色液，37℃避光反應(yīng) 20-25 分鐘 （注意：顯色時間供參考，因用戶實驗室條件差異，顯色時間會有所不同。此時肉眼可 見標準品的前 3-4 孔有明顯的梯度藍色，后 3-4 孔差別不明顯）。 
10．按每孔 0.1ml 依次加入 TMB 終止液，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。 
11．用酶標儀在 450nm 測定 OD值。

有兩種設(shè)定空白對照的方案： 
（1）將 TMB 空白顯色孔設(shè)為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去 TMB 空白顯色孔的 吸 光 值 后 ， 在 坐 標 紙 上 畫 出 曲 線 ， 以 吸 光 值 作 為 縱 坐 標 ， 以 濃 度 作 為 橫 坐 標 。 
（2）將零孔設(shè)為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后，得到的數(shù)據(jù)可以 直接在坐標紙上畫出曲線。 

注意：客戶收到我公司產(chǎn)品請*時間確認試劑盒是否有破損，酶標板是否封閉，使用前 TMB顯色液應(yīng)為無色透明溶液，若發(fā)現(xiàn)顏色異常，或者其他問題請及時與我司售后人員進行，我們會*次安排進行退換。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染，底物請避光保存。使用之后所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理，以免造成污染！

用于標記ELISA試劑盒里抗體或抗抗體的酶須具有下列特性：
1、有高度的活性和敏感性；
2、在室溫下穩(wěn)定；
3、反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn)；
4、能商品化生產(chǎn)。
當前應(yīng)用較多的有辣根過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應(yīng)用zui廣。

ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法                                  
1) 目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2) 以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3) 以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性；P／N值小于2.1，但大于1.5為可疑；P／N小于1.5為陰性。
定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。

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