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人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA檢測試劑盒

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更新時(shí)間:2020-05-12 16:52:52瀏覽次數(shù):409次

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人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)所涉及到的儀器如下:
1、酶 標(biāo) 儀
酶標(biāo)比色儀介紹:
酶標(biāo)比色儀簡稱酶標(biāo)儀,通常指于測讀ELISA結(jié)果吸光度的光度計(jì)。針對固相載體形式的不同,各有特制的適用于板、珠和小試管的設(shè)計(jì)。許多試劑公司配套供應(yīng)酶標(biāo)儀。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有:測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001,準(zhǔn)確性為lusm1%,重復(fù)性達(dá)0.5%。舉例說,若某孔測得的A值為1.083,則該孔相對于空氣的真實(shí)A值應(yīng)為1.083lusm0.01(1.073~1.093),復(fù)測定數(shù)次,其A值均應(yīng)1.083lusm0.05(1.078~1.088)在之間。酶標(biāo)儀的可測范圍視各酶標(biāo)儀的性能而不同。普通的酶標(biāo)儀在0.000~2.000,新型號的酶標(biāo)儀上限拓寬達(dá)2.900,甚至更高。超出可測上限的A值常以"*"或"over"或其它符號表示。應(yīng)注意可測范圍與線性范圍的不同,線性范圍常小于可測范圍,比如某一酶標(biāo)儀的可測范圍為0.000~2.900,而其線性范圍僅0.000~2.000,這在定量ELISA中制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)應(yīng)予注意。
酶標(biāo)儀不應(yīng)安置在陽光或強(qiáng)光照射下,操作時(shí)室溫宜在15~30℃,使用前先預(yù)熱儀器15-30分鐘,測讀結(jié)果更穩(wěn)定。
測讀A值時(shí),要選用產(chǎn)物的敏感吸收峰,如OPD用492nm波長。有的酶標(biāo)儀可用雙波長式測讀,即每孔先后測讀兩次,*次在zui適波長(W1),第二次在不敏感波長(W2),兩次測定間不移動(dòng)ELISA板的位置。例如OPD用492nm為W1,630nm為W2,zui終測得的A值為兩者之差(W1-W2)。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)參考對應(yīng)儀器說明書。
2、洗 板 機(jī)
3、離 心 機(jī)
4、培 養(yǎng) 箱

操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。ZK-M5508    小鼠泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)ELISA檢測試劑盒    mouse Ubiquitin Conjugating Enzyme E2A (UBE2A) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5509    小鼠叉頭框蛋白A2(FOXA2)ELISA檢測試劑盒    mouse Forkhead Box Protein A2 (FOXA2) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5510    小鼠回腸脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP6)ELISA檢測試劑盒    mouse Fatty Acid Binding Protein 6, Ileal (FABP6) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5511    小鼠染色框同源物3(CBX3)ELISA檢測試劑盒    mouse Chromobox Homolog 3 (CBX3) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5512    小鼠核仁素(NCL)ELISA檢測試劑盒    mouse Nucleolin (NCL) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5513    小鼠核仁磷酸蛋白(NPM)ELISA檢測試劑盒    mouse Nucleophosmin (NPM) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5514    小鼠2',5'-寡腺苷酸合成酶1(OAS1)ELISA檢測試劑盒    mouse 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 1 (OAS1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5515    小鼠神經(jīng)纖維網(wǎng)蛋白1(NRP1)ELISA檢測試劑盒    mouse Neuropilin 1 (NRP1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5516    小鼠血管抑素(ANG)ELISA檢測試劑盒    mouse Angiostatin (ANG) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5517    小鼠周期素依賴性激酶抑制因子1A(CDKN1A)ELISA檢測試劑盒    mouse Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 1A (CDKN1A) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5518    小鼠Thy1細(xì)胞表面抗原(Thy1)ELISA檢測試劑盒    mouse Thy1 Cell Surface Antigen (Thy1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5519    小鼠P-選擇素糖蛋白配體1(PSGL1)ELISA檢測試劑盒    mouse P-Selectin Glycoprotein Ligand 1 (PSGL1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5520    小鼠V-Ets骨髓成紅細(xì)胞增多癥病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA檢測試劑盒    mouse V-Ets Erythroblastosis Virus E26 Oncogene Homolog 1 (ETS1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5521    小鼠分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)ELISA檢測試劑盒    mouse Secreted Frizzled Related Protein 4 (SFRP4) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5522    小鼠次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)ELISA檢測試劑盒    mouse Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5523    小鼠肌球蛋白ⅤA(MYO5A)ELISA檢測試劑盒    mouse Myosin VA (MYO5A) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5524    小鼠興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(EAAT2)ELISA檢測試劑盒    mouse Excitatory Amino Acid Transporter 2 (EAAT2) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5525    小鼠鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶α2肽(ATP1α2)ELISA檢測試劑盒    mouse ATPase, Na+/K+ Transporting Alpha 2 Polypeptide (ATP1a2) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5526    小鼠鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β1肽(ATP1β1)ELISA檢測試劑盒    mouse ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 1 Polypeptide (ATP1b1) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物
ZK-M5527    小鼠鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶B2(ATP2B2)ELISA檢測試劑盒    mouse ATPase, Ca++ Transporting, Plasma Membrane 2 (ATP2B2) ELISA Kit    ELISA.     96T/48T    ZIKER子科生物

 

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