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上海酶聯(lián)生物研究所

分析ELISA樣本值低于空白值的原因

時(shí)間:2017-8-15閱讀:481
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在ELISA試驗(yàn)中,當(dāng)樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本的檢測。我公司ELISA試劑盒技能專家對(duì)此現(xiàn)象的原因剖析有兩個(gè)方面,一是試驗(yàn)差錯(cuò)、二是基質(zhì)效應(yīng) 。

、試驗(yàn)差錯(cuò)

差錯(cuò)分為三類,系統(tǒng)差錯(cuò)、隨機(jī)差錯(cuò)和過錯(cuò)差錯(cuò)。這三類差錯(cuò)中,系統(tǒng)差錯(cuò)對(duì)樣本值和空白值之間的差異無影響。ELISA樣本值低于空白值在差錯(cuò)方面首要來源于隨機(jī)差錯(cuò)和過錯(cuò)差錯(cuò)。

、基質(zhì)效應(yīng)

剖析中,基質(zhì)指的是樣本中被剖析物之外的組分,基質(zhì)常常對(duì)剖析物的剖析進(jìn)程有明顯的攪擾,并影響剖析成果的準(zhǔn)確性,這些影響和攪擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。ELISA試劑盒在開發(fā)進(jìn)程中,規(guī)范品不能選用人或動(dòng)物血清、血漿作為規(guī)范曲線的稀釋液,只能選用其模仿物。模仿物與被測樣本在蛋白豐度、復(fù)雜性、pH等因素都會(huì)存在差異。當(dāng)樣本的基質(zhì)與其模仿物相比,下降抗原抗體的結(jié)合,便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。形成樣本值無法計(jì)算出數(shù)值,或許數(shù)值為負(fù)。

目前zui常用的去除基質(zhì)效應(yīng)的辦法是,經(jīng)過已知剖析物濃度的規(guī)范樣品,一起盡可能堅(jiān)持樣本中的基質(zhì)不變,樹立一個(gè)校正曲線。

當(dāng)單個(gè)樣本或少數(shù)樣本值低于空白值時(shí),可能是差錯(cuò)原因,這時(shí)應(yīng)增加重復(fù),提高操作技能。當(dāng)大量樣本都低于空白值時(shí),應(yīng)考慮基質(zhì)效應(yīng)的影響,樹立校正曲線予以批改。

我們公司長時(shí)間代理國內(nèi)外品牌產(chǎn)品,產(chǎn)品包含試劑盒、生化試劑、規(guī)范品、抗體、血清。以上內(nèi)容如有不太清楚的地方,或是了解其它技能問題,歡迎您聯(lián)絡(luò)我司業(yè)務(wù)員咨詢。

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