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當(dāng)前位置:上海酶聯(lián)生物研究所>>技術(shù)文章>>ELISA試劑盒標(biāo)本的采納和保留
ELISA試劑盒有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如大便和某些分泌物)。
除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)查驗(yàn)中均以血清作為檢查標(biāo)本。
在ELISA試劑盒中血漿和血清可對(duì)等運(yùn)用。
血清標(biāo)本可按常規(guī)方法收集,應(yīng)留神防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的豚鼠ELISA試劑盒測(cè)定中,溶血標(biāo)本或許會(huì)添加非特異性顯色。
大多數(shù)豚鼠ELISA試劑盒檢查均以血清為標(biāo)本。
血漿中除尚富含纖維蛋白原和抗凝劑外,別的成份均對(duì)等于血清。
制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然凝聚、縮短后即可獲得。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢查。
ELISA試劑盒重復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)下跌,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保留作屢次檢查,宜少數(shù)分裝冰存。
保留血清自收集時(shí)就應(yīng)留神無(wú)菌操作,也可參與恰當(dāng)防腐劑(見(jiàn)3.2.4)。
可用作豚鼠elisa試劑盒測(cè)定的標(biāo)本非常廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其間某種抗體或抗原成份。
如有細(xì)菌污染,菌體中或許富含內(nèi)源性HRP,也會(huì)發(fā)作假陽(yáng)性反應(yīng)。
如在冰箱中保留過(guò)久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法豚鼠ELISA試劑盒中可使本底加深。
一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,跨越一星期測(cè)定的需低溫冰存。
凍住血清融解后,蛋白質(zhì)有些濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上劇烈振蕩。
ELISA試劑盒混濁或有堆積的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,弄清后再檢查。
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