大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(TRAIL-R4)ELISA試劑盒
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卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司
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產(chǎn)品型號96T
品 牌
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
所 在 地上海市
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更新時間:2015-03-30 10:30:21瀏覽次數(shù):111次
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大鼠多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒操作步驟:
1.從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條,未用的板條和干燥劑請放回鋁箔袋內(nèi)壓 實自封條,密封口袋,放回4℃。
2.空白孔加標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本稀釋液,其余相應(yīng)孔中加標(biāo)本或不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品(100ul/孔),用封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育90分鐘。
3.提前20分鐘準(zhǔn)備*化抗體工作液。
4.洗板5次。
5.空白孔加*化抗體稀釋液,其余孔加入*化抗體工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱孵育60分鐘。
6.提前20分鐘準(zhǔn)備酶結(jié)合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。
7.洗板5次。
8.空白孔加酶結(jié)合物稀釋液,其余孔加入酶結(jié)合物工作液(100ul/孔)。用新封板膠紙封住反應(yīng)孔,36℃孵箱,避光孵育30分鐘。
9.打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。
10.洗板5次。
11.加入顯色底物(TMB)100ul/孔,避光36℃孵箱,避光孵育15分鐘。
12.加入終止液100ul/孔, 混勻后即刻測量OD450值(3分鐘內(nèi))。在儀器保存讀數(shù)結(jié)果并打印一份紙質(zhì)結(jié)果。
13.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結(jié)束。
建議保存酶標(biāo)板框,以備下次或者今后試驗使用。
結(jié)果判斷:
1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值應(yīng)減去空白孔的OD值。
2. 手工繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),OD值作縱坐標(biāo),以平滑線連接各標(biāo)準(zhǔn)品的坐標(biāo)點(diǎn)。通過標(biāo)本的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。
3. 若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
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