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人胎盤蛋白14 (PP14)ELISA試劑盒

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基本方法二 用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至110μgml, 每孔加0.1ml4℃過夜。次日洗滌3次。

加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)

于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、56。

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ELISA試驗(yàn)中,各種檢驗(yàn)項(xiàng)目的誤差允許范圍均有待在實(shí)踐中得出結(jié)論,以上只是舉例說明質(zhì)控方法,不是定論。2SD是一般*的允許誤差限度。每批測定放一份質(zhì)控血清時(shí),一次超過2SD應(yīng)作為"告警",二次超出2SD"失控"。當(dāng)質(zhì)控過程中,出現(xiàn)失控時(shí),出現(xiàn)失控時(shí),應(yīng)查找原因,通常是試劑盒或質(zhì)控血清失效造成。更換試劑盒或更換質(zhì)控血清,找出原因糾正后重新檢驗(yàn)。如果檢驗(yàn)結(jié)果仍達(dá)不到要求或找不到原 因時(shí),應(yīng)重復(fù)進(jìn)行OCV的檢驗(yàn)。如果OCV檢驗(yàn)的結(jié)果仍是好的,說明常規(guī)操作出現(xiàn)問題。一般認(rèn)為:①一次超出3SD;②連續(xù)二次超出2SD;③3-5次連續(xù)處于一側(cè)的2SD之內(nèi);④57次連續(xù)偏向橫軸的一側(cè),均為失控。第③、④種情況,單獨(dú)依靠記錄往往是不易察覺的,但在質(zhì)控圖上可以清晰地發(fā)現(xiàn)這種失控。

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