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研究揭示CRISPR/ Cas9切割基因的方式

時(shí)間:2016-1-18閱讀:253
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一組研究人員與美國加州大學(xué)一道利用結(jié)晶技術(shù)了解了CRISPR/ Cas9基因進(jìn)行剪接的過程。在發(fā)表在科學(xué)(Science)雜志上的論文中,他們介紹了該技術(shù)過程中已知稱為R-loops的三鏈結(jié)構(gòu)的形成方式,以及他們?nèi)绾问褂谜莆盏募夹g(shù)來捕獲此過程的三維圖像,還有他們所得到的結(jié)果。

在過去的三年中,CRISPR/ Cas9基因剪接和編輯工具已被用于各種實(shí)驗(yàn),以更好地了解基因是如何工作的,并有可能對其進(jìn)行編輯來治愈遺傳性疾病。zui近新聞再次報(bào)道兩個(gè)團(tuán)隊(duì)都聲稱是該技術(shù)的*,美國和商標(biāo)局已經(jīng)同意推進(jìn)干擾聽證會(huì),以對案件做出裁決。其中由Jennifer Doudna帶領(lǐng)的團(tuán)隊(duì),現(xiàn)在已經(jīng)更加明確R-loop的形成方式是此技術(shù)手段的一部分。

CRISPR / Cas9技術(shù),顧名思義,是基于Cas9蛋白質(zhì)和其會(huì)導(dǎo)致R-loop的形成,但到現(xiàn)在為止,沒有人見過它實(shí)際上是怎樣工作的。在這個(gè)新的研究中,研究人員使用了一個(gè)此前被用于研究蛋白質(zhì)的技術(shù)——其中所研究的蛋白質(zhì)被形成結(jié)晶體,然后暴露于X射線下——所形成衍射圖案為研究其結(jié)構(gòu)提供了線索。在這種情況下,該技術(shù)在Cas蛋白正在編輯DNA序列時(shí)被研究人員用來捕捉其三維圖像——這些圖像表明,蛋白質(zhì)和DNA鏈之間的相互作用會(huì)導(dǎo)致DNA鏈彎曲一個(gè)30°角,這會(huì)使DNARNA鏈移動(dòng)到一個(gè)位置,在此會(huì)形成一個(gè)R-loop。

在基因剪接的過程中了解R-loop是如何以及為何形成,對于提高該技術(shù)是非常關(guān)鍵的——可能會(huì)犯一些錯(cuò)誤,如認(rèn)錯(cuò)和切錯(cuò)DNA鏈。但它也可能有助于在不同情況下確定其它或被用于同樣目的的蛋白質(zhì)。

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