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微小RNA(miRNA)是一類內源性非編碼小分子RNA(約22個核苷酸),通過與靶信使RNA(mRNA)形成RNA誘導的基因沉默復合物(RNA-induced silencing complex, RISC)參與轉錄后基因表達的調控,在多種生理學和病理學過程的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重大作用。大量研究工作表明某些miRNA的表達水平能夠很好地反映許多重大疾病所處的發(fā)展階段,可以作為疾病早期診斷的標志物,因此miRNA的檢測對于其生物功能的研究及疾病的臨床診斷都具有重要意義。由于miRNA分子量和表達水平都很低,因此需要極其靈敏的定量分析工具。
近日,中國科學院蘇州生物醫(yī)學工程技術研究所助理研究員繆鵬等提出了一種超靈敏的miRNA檢測方法:設計四條單鏈DNA組成DNA四面體納米結構,通過底面三巰基與金電極牢固結合;待測樣本中的miRNA可打開DNA四面體頂部的頸環(huán)結構用以捕獲DNA修飾的金納米顆粒;隨后引發(fā)雜交鏈式反應,將大量銀納米顆粒固定于電極表面;通過檢測銀納米顆粒的溶出電流信號,建立檢測miRNA濃度的標準曲線。研究結果表明該檢測方法靈敏度*,不依賴聚合酶鏈式反應,可用于細胞樣本內miRNA的檢測,在生物學基礎研究和臨床診斷上都具有潛在的應用價值。
相關結果以封面形式刊載于Chem. Commun., 2015, 51, 15629。
以上工作得到國家自然科學基金的支持。
金、銀納米顆粒TEM,DLS表征
金納米顆粒輔助信號放大
檢測不同濃度miRNA(10-16-10-7M)的線性掃描伏安圖
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