人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒
英文名:Human eosinophil cationic protein (ECP) ELISA kit
規(guī) 格 :96T/48T
保存條件:2-8℃
產(chǎn) 地 :國產(chǎn)/進口
有效期:6個月(發(fā)貨都是日期)
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。
原理
ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
注意事項:
1.在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。
2.我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃備用。如有特殊原因需要周期性收集標本,請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存,避免反復凍融。
液體類標本:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1.血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2.血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:
A、檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分)。仔細收集上清。
B、檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5)組織標本:
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?/span>2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
植物葉片的處理方法:
新鮮葉片加PBS研磨,離心,取上清,PBS濃度為0.01mol,PH值是7.4,轉(zhuǎn)速2500-3500轉(zhuǎn),10分鐘左右
葉片采好放在2-8度就可以了,可以放置一周。處理好了再放到-20保存。取一克樣本,用5mlPBS勻漿取上清,PBS為0.01M,pH為7.4的
基本操作就是取糞便500ug-1g加入2-5ml的PBS,充分勻漿(百分之20)
PBS的PH值是:7.4 PBS濃度是0.01mol
糞便
基本操作就是取糞便500ug-1g加入2-5ml的PBS,充分勻漿(百分之20)
PBS的PH值是:7.4 PBS濃度是0.01mol
take Feces 500ug-1g,add PBS 2-5ml(PH7.4 0.01mol),Homogenized by hand or Grinders(20%)
-80度保存保存半年沒有問題。
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