*原時間（PT）測定實(shí)驗

【資料簡介】

實(shí)驗方法原理    待測血漿加入過量的含鈣組織凝血活酶，重新鈣化的血漿在組織因子存在時激活因子成為X成為Xa。后者使*原轉(zhuǎn)變?yōu)?，*使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槟蝗苄岳w維蛋白，測定凝固所需時間、即為待測血漿*時間（PT）、PT測定是外源性系統(tǒng)理想和常用的篩選實(shí)驗，也可作為外源性途徑凝血固定做定量試驗，同時也可用于口服抗凝劑治療的監(jiān)控．標(biāo)本的來源與保存：

靜脈采血，置于含有1/10體積0.109mol/L*抗凝液（1份抗凝液＋9份全血）的塑料管或硅化玻璃管中，輕輕顛倒混勻．3000rpm（或25O0）離心15分鐘，收集上層液（血漿，黃色），標(biāo)本在不同條件下保存時間如下：－80℃保存，不宜超過3O天，一20℃保存，不宜超過14天，2一8℃保存，不宜超過6小時，22-24℃保存，不宜超過2小時測定．
試劑、試劑盒    PT試劑
實(shí)驗步驟    
1. 試劑重建：

于保存每瓶PT試劑加人2.0ml蒸餾水輕搖溶解．注意：試劑溶解后2－8℃可保存7天，室溫（15-25℃）可保存24小時，勿凍結(jié)．

2. 手工測定：

取待測血漿（參比血漿）0.1ml．37℃孵育2分鐘，加入37℃預(yù)溫凝血活酶0.2ml；混勻，立即啟動秒表，記錄凝固時間，即為PT值．

3. *測定：

請按儀器提供的參數(shù)操作

正常值：

1. 以時間表示11-15秒

2. 以PTD表示0.95-1.24

3. 以INR表示0.94-1.30
收起 
注意事項    
l. 采血必須使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器，貯血必須使用塑料試管或硅化玻璃管不宜使用普通玻璃管，避免*活化．

2. 采血時*不可束縛過緊并不應(yīng)超過5分鐘，否則導(dǎo)致凝血及纖溶因子活化．

3. 血液應(yīng)立即加抗凝劑，血漿制備必須及時，血漿分離應(yīng)盡快去除血小板血漿分離后應(yīng)盡快測定。

4. 血漿預(yù)溫不宜超過10分鐘．

5. 凝血活酶預(yù)溫不宜超過30分鐘。

6. 用濁度法測定終點(diǎn)的自動化凝血儀，溶血和較明顯的黃疸及脂血會影響測定結(jié)果，此時宜用手工法或電子機(jī)械或凝血儀測定．

7. 紅細(xì)胞比容超過55％或小于20％時，應(yīng)調(diào)整抗凝劑用量，抗凝劑體積（ml）＝0.00185×血液體積（ml）×（100－比容）.

8. 不宜使EDTA·Na2. 肝素，草酸鹽抗凝，應(yīng)使用0.109mol/L拘櫞酸鈉抗凝。

9. 一80℃及一20℃保存樣品，測定時37℃迅速融化，不可反復(fù)凍融．

10. 樣品采集避免溶血及組織液污染。

11. 建議各實(shí)驗室建立自己的參考值范圍。

12. 手工操作時，*原時間的終點(diǎn)計算以出現(xiàn)混濁的初期凝固為準(zhǔn)．

13. 測定溫度36.5-38.5℃過低或過高溫度均使PT延長．