人S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8試劑盒操作方法

【資料簡介】

本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍：                                                          96T

0.5μg/L -40μg/L

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中人S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8水平。用純化的人S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8，再與HRP標(biāo)記的S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人S100鈣結(jié)合蛋白鈣粒蛋白AS100A8濃度。

操作程序總結(jié)：

計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。