流式細胞術

【資料簡介】

　　流式細胞術（FlowCytometry，F(xiàn)CM）是一種對液流中排成單列的細胞或其它生物微粒（如微球，細菌，小型模式生物等）逐個進行快速定量分析和分選的技術。作為應用流式細胞術進行檢測的技術平臺，現(xiàn)代流式細胞儀產生于上世紀六七十年代。經過近四十年的發(fā)展和完善，今天的流式細胞儀已經十分成熟，并被廣泛的運用于從基礎研究到臨床實踐的各個方面，涵蓋了細胞生物學、免疫學、血液學、腫瘤學、藥理學、遺傳學及臨床檢驗等領域，在各學科中發(fā)揮著重要的作用。
　　
　　流式細胞術-概述一種在液流系統(tǒng)中，快速測定單個細胞或細胞器的生物學性質，并把特定的細胞或細胞器從群體中加以分類收集的技術。其特點是通過快速測定庫爾特電阻、熒光、光散射和光吸收來定量測定細胞DNA含量、細胞體積、蛋白質含量、酶活性、細胞膜受體和表面抗原等許多重要參數(shù)。根據(jù)這些參數(shù)將不同性質的細胞分開，以獲得供生物學和醫(yī)學研究用的純細胞群體。目前zui高分選速度已達到每秒鐘3萬個細胞?，F(xiàn)代綜合了流體力學技術、激光技術、電子物理技術、光電測量技術、計算機技術、熒光化學技術及單克隆抗體技術，是多學科多領域技術進步的結晶。隨著現(xiàn)代科技的高速發(fā)展，為了滿足生命科學對細胞分析更高層次的要求，流式細胞技術仍然在快速發(fā)展，并已經在檢測技術、分選技術及高通量分析等方面取得了許多突破。
　　
　　-簡史1934年A.莫爾達萬報道了使懸浮的紅細胞通過放置在顯微鏡載物臺上的玻璃毛細管的細胞自動計數(shù)方法。1956年W.H.庫爾特介紹一種利用細胞在導電溶液中,通過兩個小室間小孔（75～100微米）時的電阻變化（稱為庫爾特電阻）進行細胞計數(shù)和測定細胞體積的裝置。1965年L.A.卡門茨基制成了多參數(shù)流式細胞計，可測定細胞大小和核酸含量。同年，M.J.富爾懷勒又制成細胞分選器。1969年范迪拉等應用氬離子激光器和分層殼流技術，建立了一臺液流、照明光軸和檢測器軸互相正交的流式細胞計。以后，經H.R.休利特等改進了的細胞分選計，能使流動液體內的細胞噴射到空氣中進行測量。但上述各系統(tǒng)中，所使用的激光光束以及設在收集熒光的檢測方向上的限制光欄都比液流中的細胞大，因而不能提供關于細胞形態(tài)學方面的信息，故稱為零分辨率系統(tǒng)。隨后，L.L.惠利斯和S.F.帕滕發(fā)展了一種低分辨率的狹縫掃描技術，可以測定細胞核熒光、細胞和細胞核的大小。1969年，W.格德和W.迪特里希描述了使用汞燈做光源的流式細胞光度計，在落射光照明下，可激發(fā)在流動室中與光軸平行流動的細胞。-原理完整詳細資料在附件下載