士鋒生物BSA的配制方法

【資料簡介】

 1.BSA封閉液的配制

 

石蠟切片做免疫熒光的時(shí)候用4%BSA in PBS +0.05% Tween 20

 

細(xì)胞免疫熒光的時(shí)候用 1%BSA in PBS + 0.05% Tween 20

 

2.0.1%BSA怎么配

 

直接用水配就行了!按體積比就行!看你干什么用!要是用來PCR可以用dd水配制!

 

3.20%BSA應(yīng)該怎么配置

 

這是w/v濃度。20%BSA的配制方法：在無菌條件下，稱取20.00克牛血清白蛋白（BSA），用DMEM培養(yǎng)基[DMEM（高糖）購自Gibco BRL公司]溶液溶解后定容到100毫升，調(diào)pH值至7.4后用0.45 um濾膜過濾除菌（較難過濾），zui后放入4℃冰箱保存。

4.體積分?jǐn)?shù)為0.5%的牛血清白蛋白（BSA）如何配制?用水配還是用別的溶劑呢?

 

如果是做ELISA之類免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，用PBS就可以了，0。5%就是稱0。5克BSA然后溶在100mlPBS里面。

 

5.BSA溶液的配置方法?

 

牛血清白蛋白就是我們常說的BSA.

 

牛血清白蛋白的相對分子質(zhì)量為10的4次方這個(gè)級別，它不是一定的，是多聚物，有的地方測的70 000，這就是一個(gè)數(shù)據(jù)了。在做PCR的時(shí)候會用到它。

 

是血液的主要成分（38g/100ml），分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%，含糖量0.08%。僅含已糖和已糖胺，含脂量只有0.2%。白蛋白由581個(gè)氨基酸殘基組成，其中35個(gè)半組成17個(gè)二硫鍵，在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。

 

牛血清蛋白溶液可以作為測量蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線用。

 

6.請問BSA溶液怎樣滅菌，用過濾膜應(yīng)該買哪種孔徑，什么型號的過濾膜?

 

用0。22UM的。。PVDF材質(zhì)的濾膜應(yīng)該好點(diǎn)。這種膜對蛋白的吸附小點(diǎn)

 

一般買回來的牛血清蛋白是細(xì)小片狀的乳白色粉末。

 

我現(xiàn)在想做細(xì)菌的分泌蛋白。但培養(yǎng)基里有10mg/ml的BSA。收集培養(yǎng)上清后，我嘗試過用10%TCA沉淀后用丙酮或者乙醇潤洗去除BSA的方法，但都表示很理想。我想請問各位，不知道誰有好的方法可以去除BSA。謝謝。

 

直接過柱子,吸附的是BSA,別的穿透,但是樣品需要沒鹽或者鹽濃度不能太高,降低ph到4-5可以提率.

 

7.聽說免疫組化時(shí)，可以用1%BSA-PBS來稀釋一抗，不知該怎樣配制，誰試過，是否可降低背景染色?

 

就是用PBS液來稀釋BSA, 100mlPBS中加1gBSA. 一般情況下,可以提高適當(dāng)BSA的濃度,這樣的確可以減少非特異性吸附,從而降低背景染色. 也可以在稀釋液中加入其他的惰性蛋白，關(guān)鍵是要調(diào)節(jié)好一抗的濃度。