第三代輔助生殖技術(shù)中胚胎活檢技術(shù)環(huán)節(jié)安全性評估

【資料簡介】

第三代輔助生殖技術(shù)中胚胎活檢技術(shù)環(huán)節(jié)安全性評估
日前，中科院動物所周琪研究員領(lǐng)導(dǎo)的生殖工程研究組與南京醫(yī)科大學(xué)沙家豪教授實(shí)驗(yàn)室合作，研究利用小鼠作為動物模型，按照人PGD胚胎活檢操作流程構(gòu)建了PGD活檢小鼠模型，并且對胚胎早期發(fā)育、植入率及出生情況進(jìn)行了研究。通過對子代的生理表型進(jìn)行長期觀察，發(fā)現(xiàn)這些小鼠在體重指標(biāo)上與對照組小鼠存在差異，更重要的是在針對小鼠學(xué)習(xí)和記憶力的行為學(xué)檢測中，PGD活檢小鼠模型與對照組相比存在顯著差異。針對這種表型，采用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，對小鼠腦部蛋白質(zhì)表達(dá)進(jìn)行了分析。在全部差異蛋白中，約50%蛋白與神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生具有密切的關(guān)聯(lián)。活檢組小鼠的脫髓鞘病理表型明顯增加，在髓鞘切面面積及密度上都與對照組有顯著差異。因此，研究提示活檢技術(shù)有可能誘發(fā)子代小鼠的神經(jīng)退行性疾病發(fā)生，有必要增加對輔助生殖技術(shù)中相關(guān)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)研究，建立規(guī)范的操作體系，從而將這種風(fēng)險降低到zui小。

據(jù)悉，第三代輔助生殖技術(shù)在1990年獲得成功。這項(xiàng)技術(shù)主要針對家族遺傳病史的人群及高齡產(chǎn)婦，在其胚胎發(fā)育早期利用胚胎活檢技術(shù)去除一個卵裂球，經(jīng)分子生物學(xué)檢測后，正常的胚胎將被移入婦女子宮，而異常的胚胎將被棄掉，因此這種技術(shù)稱之為植入前遺傳診斷（Preimplantation Genetic Diagnosis，PGD）技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)的重要意義在于已經(jīng)不單單是針對治療那些不孕不育人群，而是通過這項(xiàng)技術(shù)可以提高整體的人口出生質(zhì)量，提高人口素質(zhì)。但是針對這項(xiàng)技術(shù)開展的基礎(chǔ)研究還比較薄弱，特別是針對該技術(shù)在子代長期發(fā)育中是否存在潛在的風(fēng)險還沒有被闡述。（

21：克隆胚胎干細(xì)胞與正常受精胚胎干細(xì)胞具有相似發(fā)育潛能
近日，北京生命科學(xué)研究所（NIBS）高紹榮實(shí)驗(yàn)室與北京蛋白質(zhì)中心等合作在Proteomics雜志在線發(fā)表題為“Embryonic stem cells derived from somatic cloned and fertilized blastocysts are post-transcriptionally indistinguishable: A MicroRNA and protein profile comparison”的文章。該文章報道了使用miRNA芯片和蛋白質(zhì)組技術(shù)分析了體細(xì)胞克隆胚胎干細(xì)胞和正常受精胚胎干細(xì)胞在miRNA水平和蛋白質(zhì)表達(dá)水平，證明體細(xì)胞克隆胚胎干細(xì)胞與正常受精胚胎干細(xì)胞在轉(zhuǎn)錄后水平高度類似。

體細(xì)胞核移植可以利用特異個體的分化細(xì)胞構(gòu)建克隆胚胎從而可能得到病人特異的核移植胚胎干細(xì)胞系，已有的報道已經(jīng)在小鼠和非人靈長類中基于這種技術(shù)成功實(shí)施了治療性克隆。但是由于在克隆動物中發(fā)現(xiàn)了大量嚴(yán)重的異常表型，導(dǎo)致了人們對于治療性克隆在安全性上的擔(dān)心。雖然在轉(zhuǎn)錄水平和發(fā)育潛力上，克隆與正常受精的胚胎干細(xì)胞系沒有明顯差異，但是在轉(zhuǎn)錄后水平上的系統(tǒng)比較還是空白。為了鑒定克隆和正常受精的胚胎干細(xì)胞在轉(zhuǎn)錄后水平上是否存在差異，我們通過miRNA芯片、2-D DIGE和生物信息學(xué)方法，比較了5個克隆和相對應(yīng)的正常胚胎干細(xì)胞系的miRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)豐度。進(jìn)一步用stem-loop RT-PCR檢測特異miRNAs的表達(dá)水平，運(yùn)用質(zhì)譜分析技術(shù)進(jìn)一步鑒定差異表達(dá)蛋白。我們的結(jié)果表明，在miRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)豐度上，克隆和正常受精的胚胎干細(xì)胞是高度類似的，這些結(jié)果與它們類似的發(fā)育潛力和轉(zhuǎn)錄水平是一致的，進(jìn)一步證明克隆胚胎干細(xì)胞和正常受精來源的胚胎干細(xì)胞具有高度類似的治療潛力。