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總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作中常見問(wèn)題有哪些

2012年11月02日 10:04:53人氣:738來(lái)源:上海天齊生物科技有限公司

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總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作中常見問(wèn)題有哪些:

 

標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素:

 

嚴(yán)重溶血,以 HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽(yáng)性; 混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;如有 細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng); 標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果; 采血試管洗滌不*、反復(fù)使用易交叉污染; 塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。

 

 

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