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人β2糖蛋白1抗體IgG酶聯免疫分析試劑盒使用說明書

2012年07月05日 10:45:00人氣:238來源:上海科興商貿有限公司

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【資料簡介】

                 人β2糖蛋白1抗體IgG酶聯免疫分析試劑盒使用說明書
使用目的:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本β2糖蛋白1抗體IgG含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人β2糖蛋白1抗體IgG水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入β2糖蛋白1抗體IgG,再與HRP標記的抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的β2糖蛋白1抗體 IgG呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠β2糖蛋白1抗體 IgG濃度。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2000 pg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
1000pg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
500pg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
250 pg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
125pg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

上海科興商貿有限公司作者

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