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研究人員開發(fā)出高產(chǎn)多不飽和脂肪酸的細(xì)胞工廠
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- 【資料簡(jiǎn)介】
多不飽和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids,PUFAs)是構(gòu)成細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)成分,具有重要生理功能。其中,具有代表性的ω-3型多不飽和脂肪酸二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA),是人體自身不能直接從頭合成而又*的營養(yǎng)素。EPA被譽(yù)為“血管清道夫”,具有調(diào)節(jié)血脂、降低血液粘稠度、預(yù)防血栓形成等生理活性,DHA是大腦和視網(wǎng)膜組織中磷脂的重要組成物質(zhì),皆有助于促進(jìn)人體健康。目前,獲取EPA/DHA產(chǎn)品的主要途徑是海洋漁業(yè)資源提?。ɡ玺~油),但這些來源的產(chǎn)品也面臨著資源難以持續(xù)、污染風(fēng)險(xiǎn)大和感官品質(zhì)低等問題,研究開發(fā)新的EPA/DHA資源具有巨大應(yīng)用前景。
裂殖壺菌(Aurantiochytrium sp.)是目前工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)PUFAs的代表性物種之一,具有高生物量、高油脂含量、易培養(yǎng)等特點(diǎn)。但作為一種非模式真核生物,其遺傳操作體系還不完善,對(duì)油脂合成路徑的理解也非常有限,是進(jìn)一步通過代謝工程提升和改良油脂產(chǎn)量和品質(zhì)的主要障礙。
中國青島生物能源與過程研究所代謝物組學(xué)研究組致力于裂殖壺菌的遺傳改造、作用機(jī)制及代謝工程研究,通過人工改造裂殖壺菌提高其EPA/DHA產(chǎn)量,用于補(bǔ)充現(xiàn)有PUFAs產(chǎn)品的不足。近日,該研究組基于病毒2A肽自剪切的特點(diǎn),開發(fā)出基于2A肽的裂殖壺菌的多基因表達(dá)體系,實(shí)現(xiàn)裂殖壺菌的多基因表達(dá),并利用該體系將外源的EPA合成基因簇在裂殖壺菌中進(jìn)行異源表達(dá),使EPA產(chǎn)量提高5倍。相關(guān)成果發(fā)表在食品科學(xué)領(lǐng)域期刊Journal of Agriculture and Food Chemistry上。
同時(shí),該研究組通過生物信息學(xué)方法,*鑒定到特異性作用于裂殖壺菌PUFA合成途徑的磷酸泛酰巰基乙胺基?;D(zhuǎn)移酶(Phosphopantetheinyl transferase,PPTase),并通過生理生化實(shí)驗(yàn)確定該P(yáng)PTase的功能特性,將其在裂殖壺菌中進(jìn)行過表達(dá),使裂殖壺菌的DHA和PUFA產(chǎn)量分別提高36%和18%。
基于2A肽的多基因表達(dá)系統(tǒng)克服了裂殖壺菌在遺傳操作工具不足難以進(jìn)行多基因共表達(dá)的情況,為裂殖壺菌的遺傳改造提供了新的技術(shù)手段,也為其他真菌中多基因共表達(dá)提供了范例。作用于裂殖壺菌PUFA合成途徑的PPTase的發(fā)現(xiàn),加深了對(duì)裂殖壺菌PUFA合成的理解,為進(jìn)一步的遺傳改造提供了新靶點(diǎn)
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