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當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光-PCR法>> 禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時間:2019-04-16 13:43:27瀏覽次數(shù):2891次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線大豆內(nèi)源基因Lectin核酸檢測試劑盒供應(yīng)商
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。?產(chǎn)品名稱:禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒品牌
規(guī)格:48T/盒
類別:熒光-PCR法
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實驗,合成實驗等試驗。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個月。
自備試劑:樣品 RNA。
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性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多熒光-PCR法。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個月
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。?2,9-二基-4,7-聯(lián)苯-,0-鄰二氮雜菲 4733-39-5 24 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
3,6-二羥基鄰苯二甲 4733-50-0 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
2-溴丁乙酯 533-68-6 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
(S)--溴-2-基丁烷 534-00-9 24 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
,2-戊二醇 5343-92-0 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
4-溴-3-硝苯甲醚 5344-78-5 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
3-氯-4-甲氧苯胺 5345-54-0 24 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
0-溴--癸醇 53463-68-6 00次 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
4-(溴乙?;?啶鹽 5349-7-7 00次 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
2-氟-5-三氟基胺 535-52-4 20次 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
(S)-3-羥基丁酯 53562-86-0 00次 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
2-氯噻吩-5-胺 53595-66-7 48 t Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
4-基酰芐溴 53606-06-7 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
alpha-溴代-4-氯苯乙酮 536-38-9 50 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
2-溴-3-基甲 53663-39- 48 T Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒品牌M-肉湯 規(guī)格: 0.2ml Rat Lactate Dehydrogenase,LDH
煌綠黃嘧啶瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Lactoferrin,LTF/LF
BGS瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat mammary carcinoma Marker-CA53
XLD培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat Tri-iodothyronine,T3
去氧膽鹽枸櫞鹽瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat pigment epithelium-derived factor,PEDF
去氧膽鹽枸櫞鹽乳糖蔗糖瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78
V-J瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Nerve growth factor,NGF
NAC瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.2ml Rat neuropeptide Y,NP-Y
馬鈴薯葡萄糖瓊脂 規(guī)格: 0.ml Rat Neuron-specific enolase,NSE
(紅)亮綠瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat Neurotrophin 3,NT-3
梭菌增菌培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat Neurotrophin 4,NT-4
哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.2ml Rat Epinephrine/Adrenaline,EPI
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 規(guī)格: 0.ml Rat adrenergic alpha-A receptor,ADRAA
哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ) 規(guī)格: 0.ml Rat adrenomedullin,ADM
226E瓊脂 規(guī)格: 0.2ml Rat Renin
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