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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2019-04-03 15:07:01瀏覽次數(shù):407次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線產(chǎn)品名稱(chēng):芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌
英文名稱(chēng):Bacillus spp.PCR
規(guī)格:詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
類(lèi)別:PCR檢測(cè)試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測(cè)試劑盒。
.芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
使用方法:
一、芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。?Ferrous oxalate dihydrate草低鐵25克3N
Ferrous lactate乳低鐵500毫克BR,90%
Ferrosoferric oxide磁性鐵5克5N,99.999%
Ferron高鐵試劑250克3.5N
Ferrocene環(huán)二鐵25片3N,99.9%
Ferric tartrate酒石鐵(III)250克3N
Ferric phosphate dihydrate磷高鐵二水物5毫克高純
Ferric hydroxide有水鐵克2.7N,99.7%
Ferric citrate枸椽鐵25毫克生物技術(shù)級(jí),90%
Ferene S5,5'-[3-(2-基)-,2,4-三嗪-5,6-二基]二-2-磺二鹽5克3N
FDP,6-二磷果糖三鹽KU超純,99%
FDG代脫氧葡萄糖00毫克AR,99%
FDA二熒光素00克BR,
FCA弗氏*佐劑5克CP,99%
Fast Violet B Salt固紫B鹽0克試劑級(jí),90%
芽孢桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒品牌乙酰紫草素 英文名稱(chēng):Acetylshikonin CAS號(hào):24502-78- 規(guī)格:20mg
6''-O-丙二?;玖夏拒? 英文名稱(chēng):6''-O-Malonylgenistin CAS號(hào):50-05-3 規(guī)格:5mg
(-)-丁香樹(shù)脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷 英文名稱(chēng):Episyringaresinol 4'-O-β-D-glncopyranoside CAS號(hào):37038-3-2 規(guī)格:0mg
白麻苷 英文名稱(chēng):Quercetin 3-O-sophoroside CAS號(hào):8609-7- 規(guī)格:20mg
莪術(shù)呋喃二烯酮 英文名稱(chēng):Furanodienon CAS號(hào):24268-4-5 規(guī)格:0mg
,7-雙苯-5-羥基-6-庚烯-3-酮 英文名稱(chēng):5-Hydroxy-,7-diphenyl-6-hepten-3-one CAS號(hào):87095-74-7 規(guī)格:0mg
堪非醇-3-O-桑布雙糖苷 英文名稱(chēng): Leucoside CAS號(hào):2766-5-4 規(guī)格:0mg
去氧紫草素 英文名稱(chēng):Deoxyshikonin CAS號(hào):43043-74-9 規(guī)格:0mg
β-乙酰氧基異戊酰阿卡寧 英文名稱(chēng):β-Acetoxyisovalerylalkannin CAS號(hào):6909-7-4 規(guī)格:0mg
6''-丙二酸沙苑子苷單酯 英文名稱(chēng):Complanatuside 6′′-malonate CAS號(hào): 規(guī)格:0mg
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