人CD44變體6ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟：

. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔0孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品00μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取00μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為80 ng/L，20 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，5 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品0μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鐘.

0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘。

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HT-29

人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株；Mo7e

人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞；NCI-H57

人前列腺癌細(xì)胞；PC-3 [PC3]

人紅系白血病細(xì)胞；TF-

人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；UACC82

人類(lèi)原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞；UT-7

人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A-375 [A375]

人乳腺導(dǎo)管瘤細(xì)胞；BT-474

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 205

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；COLO 320DM [COLO320DM]

人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞；Daudi

人十二脂腸腺癌；HuTu-80

人鼻咽癌細(xì)胞；CNE-2Z

人胎盤(pán)絨膜癌細(xì)胞；BeWo

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；HCT 6 [HCT6]

人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；Jurkat D,E

人T淋巴瘤細(xì)胞Jurkat亞系；Jurkat77

人口腔表皮樣癌細(xì)胞；KB

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；LoVo

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW480 [SW 480；SW-480]

急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；TALL-04

人腎癌細(xì)胞；A498

人宮頸癌細(xì)胞；C-33A

人宮頸癌細(xì)胞；Hela 229 [HeLa229]

人宮頸癌細(xì)胞；Hela P0s-F

人宮頸癌細(xì)胞；Hela S3 [HeLaS3]

人胰腺腺泡上皮癌；HPAC

人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；HuT 78

人肺鱗癌細(xì)胞；NCI-H520

人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M IE8

人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PC-3M-2B4

人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-BE

人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株；PG-LH7

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞；SW620 [SW 620；SW-620]

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；U-87 MG [U87MG；U87 MG]

人肺癌細(xì)胞；A-427 [A427]

人胰腺癌細(xì)胞；AsPC-

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；C98

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞；Daoy

人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞；HCC38

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；M69

人胃癌細(xì)胞；MGC-803

綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞；MGC803-GFP

人胃癌細(xì)胞；MKN-45

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；MuM-2B