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國產(chǎn)ELISA試劑盒的溫育法需做到的幾點(diǎn)

時間:2018/8/21閱讀:1011
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   國產(chǎn)ELISA試劑盒溫育這一步是臨床ELISA測定中zui容易出現(xiàn)問題的步驟。通常目前國內(nèi)ELISA商品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃ 30分鐘~小時,進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃ ~2小時才能有較*的結(jié)合,低于小時,可能會影響測定下限。因此,關(guān)于溫育,在實(shí)際測定操作中一定要注意以下幾點(diǎn): 
      ELISA試劑盒要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時間。一般來說,加完樣本和/或反應(yīng)試劑后,將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時,孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃,需要一定的時間,尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下,這段升溫時間可能還比較長,而在臨床實(shí)驗(yàn)室中,很少有人注意這個問題,通常是將微孔板一放入溫箱即開始計(jì)時,這樣就很容易造成實(shí)際測定中溫育時間不夠,弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個問題,就是在每一年的冬季總有那么一個多月的時間,在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中,測定由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)的 ng/ml弱陽性樣本時,總是測不出來,不知原因?yàn)楹??ELISA試劑盒這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān),此時微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時間不夠,以致弱陽性樣本測定為陰性。因此,國產(chǎn)ELISA試劑盒為保證37℃下足夠的溫育時間,臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)(不同室溫下)微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃,從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時間。具體的做法是,用一小溫度計(jì)放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。

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