目前ELISA法檢測(cè)用試劑盒種類繁多，有國外進(jìn)口的，有國內(nèi)自行研制生產(chǎn)的，如何在眾多的品牌中選擇既能滿足檢測(cè)要求又價(jià)格低廉的試劑盒是一個(gè)問題。一般在試劑盒說明書中列出以下指標(biāo)：zui低檢測(cè)限；回收率；交叉反應(yīng)率；標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜及數(shù)據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個(gè)濃度組成；IC50測(cè)定值及變形曲線點(diǎn)數(shù)目的是比較規(guī)范的試劑盒可以選擇。以下針對(duì)ELISA試劑盒試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證的幾個(gè)方法解析，歡迎閱讀分享。

在使用ELISA法檢測(cè)樣品時(shí)，應(yīng)對(duì)方法進(jìn)行驗(yàn)證。主要測(cè)定以下內(nèi)容：
1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個(gè)濃度組成，測(cè)定次數(shù)不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。一般臨界值為IC50附近，檢測(cè)靈敏度高。
2 樣品檢測(cè)限的測(cè)定。
3 樣品添加回收實(shí)驗(yàn)。對(duì)禁用藥物可添加定量限和2倍定量限，對(duì)于有zui高殘留*(MRL)的藥物，可添加MRL和MRL上下各一個(gè)濃度。
準(zhǔn)確度：若回收率大于40％符合相應(yīng)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。精密度：批內(nèi)變異系數(shù)每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25％，對(duì)于禁用藥物小于或等于30％。批間變異系數(shù)所有樣品間變異系數(shù)小于或等于30％，對(duì)于禁用藥物小于或等于40％。
滿足以上準(zhǔn)確度和精密度要求，說明ELISA方法可行，可用來檢測(cè)藥物殘留。
4 對(duì)于可用于多殘留檢測(cè)的試劑盒，以交叉反應(yīng)率低的藥物做陽性添加測(cè)定臨界值(cut-off)。
5 實(shí)際檢測(cè)樣品時(shí)要包括以下實(shí)驗(yàn)：至少做兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，兩個(gè)陰性對(duì)照品，兩個(gè)添加臨界值(cut-off)的陽性對(duì)照品，兩個(gè)平行的待檢樣品。檢測(cè)結(jié)果出來后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線形狀(符合檢測(cè)要求為S形)，IC50與臨界值是否相近及陽性樣品回收率，樣品平行情況可確定檢測(cè)是否可信。

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