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大鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒來電咨詢

閱讀:934發(fā)布時間:2013-08-08

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大鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白細(xì)胞介素4IL-4水平。用純化的大鼠白細(xì)胞介素4IL-4抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白細(xì)胞介素4IL-4),再與HRP標(biāo)記的白細(xì)胞介素4IL-4抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素4IL-4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠白細(xì)胞介素4IL-4濃度。
試劑盒組成

1
20倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
3ml×1瓶
2
酶標(biāo)試劑
3ml×1瓶
8
標(biāo)準(zhǔn)品(240pg/ml)
0.5ml×1瓶
3
酶標(biāo)包被板
12孔×4條
9
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
3ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
3ml×1瓶
11
封板膜
2張 
6
顯色劑B液
3ml×1/瓶
12
密封袋
1個

大鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒

操作步驟
1.         標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

120pg/ml
5號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60pg/ml
4號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30pg/ml
3號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15pg/ml
2號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5pg/ml
1號標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.         加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.         溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
4.         配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.         洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.         加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.         溫育:操作同3。
8.         洗滌:操作同5。
9.         顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10.     終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.     測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

大鼠白細(xì)胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒部分推薦產(chǎn)品:

人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑盒
人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒
人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒
人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3 Ab-IgG)ELISA試劑盒
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒
人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒
人抗SS-A/Ro抗體ELISA試劑盒
人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒
人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA試劑盒
人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒
人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)ELISA試劑盒


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