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胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒原理
點(diǎn)擊次數(shù):566 發(fā)布時間:2012-7-10
胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)是回腸內(nèi)分泌細(xì)胞分泌的一種腦腸肽,目前主要作為2型糖尿病藥物作用的靶點(diǎn)。由于GLP-1可抑制胃排空,減少腸蠕動,故有助于控制攝食,減輕體重。在19例肥胖患者中進(jìn)行的前瞻性安慰劑對照、隨機(jī)、雙盲、交叉試驗(yàn)中,GLP-1皮下注射給藥可增加患者餐后的飽腹感,并使每餐的飲食量平均減少15%。但由于GLP-1是多肽,不能口服給藥是其一大缺憾。
研究已證實(shí),腸促胰素以葡萄糖濃度依賴性方式促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素,并減少胰島α細(xì)胞分泌胰高血糖素(glucagon),從而降低血糖。正常人在進(jìn)餐后,腸促胰素開始分泌,進(jìn)而促進(jìn)胰島素分泌,以減少餐后血糖的波動。但對于2型糖尿病患者,其“腸促胰素效應(yīng)”受損,主要表現(xiàn)為進(jìn)餐后GLP-1濃度升高幅度較正常人有所減小,但其促進(jìn)胰島素分泌以及降血糖的作用并無明顯受損,因此GLP-1及其類似物可以作為2型糖尿病治療的一個重要靶點(diǎn)。
以下幾方面發(fā)揮降糖作用GLP-1具有保護(hù)β細(xì)胞的作用GLP-1可作用于胰島β細(xì)胞,促進(jìn)胰島素基因的轉(zhuǎn)錄、胰島素的合成和分泌并可刺激胰島β細(xì)胞的增殖和分化,抑制胰島β細(xì)胞凋亡,增加胰島β細(xì)胞數(shù)量[2-5]。此外,GLP-1還可作用于胰島α細(xì)胞,強(qiáng)烈地抑制胰高血糖素的釋放,并作用于胰島δ細(xì)胞,促進(jìn)*的分泌,*又可作為旁分泌激素參與抑制胰高血糖素的分泌。
研究證明,GLP-1可通過多種機(jī)制明顯地改善2型糖尿病動物模型或患者的血糖情況,其中促進(jìn)胰島β細(xì)胞的再生和修復(fù),增加胰島β細(xì)胞數(shù)量的作用尤為顯著,這為2型糖尿病的治療提供了一個非常好的前景。
GLP-1具有葡萄糖濃度依賴性降糖作用作為一種腸源性激素,GLP-1是在營養(yǎng)物質(zhì)特別是碳水化合物的刺激下才釋放入血的,其促胰島素分泌作用呈葡萄糖濃度依賴性,Nauck等[6]對10例血糖控制不佳的2型糖尿病患者進(jìn)行了研究,并在空腹?fàn)顟B(tài)下分別給予患者GLP-1或安慰劑,結(jié)果顯示,患者在輸注GLP-1后,其胰島素和C肽水平顯著增加,胰高血糖素水平顯著降低,空腹血糖水平在4小時后變?yōu)檎?。在血糖水平正常?雖然仍持續(xù)輸注GLP-1,患者的胰島素水平卻不會再升高,血糖水平也維持穩(wěn)定,不再進(jìn)一步下降。這說明GLP-1具有葡萄糖濃度依賴性降糖作用,即只有在血糖水平升高的情況下,GLP-1才發(fā)揮降糖作用,而在血糖水平正常時,則不會使其進(jìn)一步降低。GLP-1的這種葡萄糖濃度依賴性降糖特性是其臨床應(yīng)用安全性的基礎(chǔ)與保障,從而免除了人們對現(xiàn)有糖尿病治療藥物及方案可能造成患者嚴(yán)重低血糖的擔(dān)心。
GLP-1具有減輕體重的功效燦德爾(Zander)等[7]研究顯示,在接受GLP-1治療6周后,參與研究的20例2型糖尿病患者的體重平均減輕了1.9kg。研究者認(rèn)為,GLP-1是通過多種途徑產(chǎn)生降低體重的作用,包括抑制胃腸道蠕動和胃液分泌,抑制食欲及攝食,延緩胃內(nèi)容物排空。此外,GLP-1還可作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)(特別是下丘腦),從而使人體產(chǎn)生飽脹感和食欲下降。
除此之外,GLP-1還具有許多其他生物學(xué)特性及功能,例如,GLP-1可能發(fā)揮降脂、降壓作用,從而對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生保護(hù)作用;它還可通過作用于中樞增強(qiáng)學(xué)習(xí)和記憶功能,保護(hù)神經(jīng)。
胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中胰高血糖素樣肽1(GLP-1)(GLP-1)ELISA試劑盒水平。用純化的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)(GLP-1)ELISA試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒,再與HRP標(biāo)記的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中胰高血糖素樣肽1(GLP-1)(GLP-1)ELISA試劑盒濃度。