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　　目前對(duì)于血清中可溶性粘附分子的檢測(cè)多采用ELISA試劑盒，5種可溶性粘附分子在正常人血漿中濃度的變化范圍及某些疾病狀態(tài)下的變化。不同來源的試劑盒由采用抗體特異性和親和力的差別、以及標(biāo)準(zhǔn)品不同，所得出的正常值范圍有較大差異，因此有必要對(duì)這種檢測(cè)手段加以標(biāo)準(zhǔn)化。值得注意的采用這種方法檢測(cè)得到的濃度值未必能夠準(zhǔn)確反映可溶性粘附分子的實(shí)際水平，因?yàn)榭扇苄哉掣椒肿映杂坞x狀態(tài)存在外，還可以與細(xì)胞表面游離的配體結(jié)合，用常規(guī)的ELISA法無法檢測(cè)結(jié)合狀態(tài)的可溶性粘附分子。此外，對(duì)所測(cè)得的可溶性粘附分子水平應(yīng)從粘附分子產(chǎn)生和清除兩方面進(jìn)行分析，產(chǎn)生的增加和清除的減少都可造成可溶性粘附分子血中水平的升高，是兩個(gè)不同原因所導(dǎo)致的相同結(jié)果。
　　
　　可溶性粘附分子elisa試劑盒，種屬齊全，檢測(cè)程序?yàn)椋?br />　　
　　在使用前，將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議，所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測(cè)定一式兩份。
　　
　　1。準(zhǔn)備好所有試劑，工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
　　
　　2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用，并把任何剩余的井和入袋干燥劑，密封保鮮袋，將未使用的井在4°C的含量布局表
　　
　　。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí)，在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
　　
　　4。每孔中取出的液體，不洗。
　　
　　5。向每孔中加入100μl*抗體（1倍）。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí)，在37℃下（*抗體（1X）可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫，輕輕混勻，直到出現(xiàn)均勻解決方案。）
　　
　　6。吸液的各孔和洗滌，共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈，每孔填充洗滌緩沖液（200μL）使用噴瓶，多道移液器，歧管器，或autowasher，和，靜置2分鐘，*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后，清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。
　　
　　7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白（1×）。量的微量滴定板，用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí)，在37℃下
　　
　　8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中，在步驟6的5倍。
　　
　　9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘，在37℃下避光
　　
　　10。一站式解決方案，每孔加入底物，輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板，以確保充分混合。
　　
　　11。在5分鐘內(nèi)，設(shè)置至450nm，使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長(zhǎng)校正，設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長(zhǎng)在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接，可能會(huì)比較高，不太準(zhǔn)確。