一、原理
細胞融合(Cell fusion)，即在自然條件下或用人工方法(生物的、物理的、化學的)使兩個或兩個以上的細胞合并形成一個細胞的過程。人工誘導的細胞融合，在六十年代作為一門新興技術而發(fā)展起來。由于它不僅能產生同種細胞融合，也能產生種間細胞的融合，因此細胞融合技術目前被廣泛應用于細胞生物學和醫(yī)學研究的各個領域。
細胞融合的誘導物種類很多．常用的主要有滅活的仙臺病毒(Sendai virus)，聚乙二醇(Polyethyleneglycol，PEG)和電脈沖。目前應用zui廣泛的是聚乙二醇，因為它易得、簡便，且融合效果穩(wěn)定。PEG的促融機制尚不*清楚，它可能引起細胞膜中磷脂的酰鍵及極性基團發(fā)生結構重排。
二、方法
(1)取新鮮雞血以0.85％生理鹽水制成10％的懸液。
(2)稱取0.5克PEG(MW=4,000)放入試管內，在酒精燈上融化之，迅速加入0.5ml預熱的Hanks液混勻制成50％的PEG溶液。放入37℃水浴中待用。
(3)取上述10％的雞紅細胞懸液1ml放入離心管中，再加入5ml Hanks液混勻，然后以1,000rpm離心5分鐘，小心棄去上清，用指彈法將細胞團塊彈散。
(4)取上述50％PEG溶液0.5ml，在1分鐘內滴加到雞紅細胞懸液，邊加邊輕輕搖動混勻。待PEG全部加入后靜置1分鐘左右。此全部過程都要求在37℃水浴內進行。
(5)緩慢滴加9ml Hanks液以終止PEG的作用，在37℃水浴內靜置5分鐘。
(6)離心棄上清后，取一滴融合后的細胞懸液滴片，加蓋片鏡檢。
三、結果觀察
在高倍鏡下可以看到有兩個或兩個以上的雞紅細胞膜融合在一起，形成一個異核體細胞。要注意辨別融合細胞與重疊的雞紅細胞。
四、融合率的計算
在高倍鏡下隨機計數200個細胞(包括融合的與未融合的細胞)，以融合細胞(含兩個或兩個以上的細胞核的細胞)的細胞核數除以總細胞核數(包括融合與未融合的細胞核)即得出融合率。
