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Nylon Wool Fiber T細胞分離尼龍毛柱

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品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地北京市

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更新時間：2018-06-04 05:42:42瀏覽次數：568次

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商鋪產品：156條

所在地區(qū)：北京北京市

聯系人：楊陽 （主管）

產品簡介

尼龍毛是免疫學中用于分離T細胞的產品。

詳細介紹

　　尼龍毛是免疫學中用于分離T細胞的產品。在研究體內及體外的免疫系統(tǒng)時，分離淋巴細胞群是一個關鍵步驟，而市場上并沒有針對B細胞的特異性抗血清，所以分離淋巴細胞中的T細胞有些麻煩。T細胞尼龍毛分離法利用了尼龍毛對B細胞的吸附力，從而使T細胞在沒有嚴重損傷的情況下達到的足夠的純度。該方法不像流式和磁珠那樣費用昂貴，而且操作簡便，所需要的條件也不高，是一種非常實用的方法。

 
 
　　操作方法：
 
　　1.秤取1.5g尼龍毛柱裝入20-30ml玻璃容器或注射器內，填料的體積控制在15毫升左右。因為尼龍毛的松緊關系到T細胞的回收率，所以要特別注意。注射器下端配接5厘米左右長的帶有彈簧夾的橡皮管。
 
　　2. 加入大量的PBS平衡柱子后，用鋁箔包裹，并置于適當的容器內，高壓滅菌15分鐘。
 
　?。ㄉ唐坊猃埫陨喜襟E可以省略，經過PBS平衡后可以直接進行下列步驟。）
 
　　3. 滅菌的尼龍毛柱垂直固定后放于超凈臺內，頂部以鋁箔覆蓋，避免污染。
 
　　4. 注射器下端，橡皮管，彈簧夾用*消毒。打開彈簧夾調節(jié)流速在大約3-4ml/min。
 
　　5.首先，加入3-4倍柱體的無血培養(yǎng)基平衡，之后加入相同體積的含有血清的培養(yǎng)基平衡（上述培養(yǎng)基都要預熱），zui后等培養(yǎng)基液面接近柱填料液面時，關閉彈簧夾。
 
　　6. 樣本細胞懸浮液濃度控制在約5×108cells/ml，上樣量一般是1/3-1/5柱體積。樣品加入之后，再加入少量培養(yǎng)液，然后關閉彈簧夾。
 
　　7.覆蓋鋁箔，垂直固定，置于消毒過的容器中，于培養(yǎng)箱內37℃孵育1小時。此過程中柱子必須要保持垂直狀態(tài)。
 
　　8. 從培養(yǎng)箱中拿出柱子，置于超凈臺內，除去鋁箔。接上按照4.中的方法消毒的彈簧夾和橡皮管，加入適當體積經37℃預熱的培養(yǎng)基，打開彈簧夾控制流速在3-4 mL/min，流出約5ml之后，流出的培養(yǎng)液基變得不透明，此時其中含有T細胞，收集這一部分培養(yǎng)基。
 
　　9. 基本上何時結束收集取決于流出液體中細胞的濃度，實際上，收集的量達到一個柱體積時就可以停止收集，因為即使收集更多的量，回收率幾乎不會增加。
 
　　10.上述操作后，細胞的
 
　　回收率為： 15~20 ％
 
　　T細胞含量： 85~95 ％
 
　　B細胞污染率： 1 5 ％
 
　　多數細胞被確定為T細胞。
 
　　（注）收集粘附于尼龍毛上的細胞時，將T細胞收集完畢后的尼龍毛再無菌操作的狀態(tài)下取出，轉移到適當的容器中，用鑷子小心的將尼龍毛松開，粘附的細胞可以洗到培養(yǎng)基中?；蛘邔⒆⑸淦餍静迦胱⑸淦鲀龋ㄟ^壓力使的粘附的細胞隨著液體流出。

訂貨信息

貨號
產品名稱
規(guī)格
18369-50
尼龍毛
50g
18369-10
尼龍毛
10g
21759-1
尼龍毛柱 預裝好
10支

關鍵詞：培養(yǎng)箱

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