親脂性碳菁類染料DiI, DiO and DiD通過徑向擴(kuò)散穿過細(xì)胞膜并對整個細(xì)胞進(jìn)行染色，被用來有效持久的標(biāo)記細(xì)胞膜和間質(zhì)膜結(jié)構(gòu)。這類細(xì)胞示蹤劑以較低的細(xì)胞毒性（對細(xì)胞活性、發(fā)育或其它基本的生理特性無明顯影響）和抗胞間轉(zhuǎn)移性（不會從標(biāo)記細(xì)胞擴(kuò)散到非標(biāo)記細(xì)胞，避免了交叉染色）在以下實驗中廣泛使用：
- 細(xì)胞融合實驗
- 細(xì)胞粘附
- 細(xì)胞遷移
DII以及與其結(jié)構(gòu)類似的PKH26熒光染料的親脂性給實驗的實際操作（需要*調(diào)劑滲透壓等）帶來了繁瑣的步驟，為了提高科研者的工作效率，Biotium的細(xì)胞膜熒光示蹤試劑盒（CellBrite™ Cytoplasmic Membrane Staining Kits）應(yīng)運而生了，盒中的即用型染色試劑直接加入帶有培養(yǎng)基的懸浮細(xì)胞或者貼壁細(xì)胞進(jìn)行染色，大大方便了廣大工作者，而且在熒光顏色上也可進(jìn)行一些根據(jù)需要的選擇：
- 橘紅色熒光（DiI）
- 綠色熒光（NeuroDiO）
- 紅色熒光（DiD）
- 藍(lán)色熒光（DiB）
還可大膽設(shè)計一下：雙染料混合，標(biāo)記細(xì)胞，對細(xì)胞的融合和穩(wěn)定聚集的研究是不是帶來了新的色彩？顯微鏡的濾光片配置這里要特別說明一下，避免臨時抓狂！
顯微鏡Microscopy
• DiI and NeuroDiO = Omega XF52, Chroma 51004
• DiI and DiD = Omega XF92, Chroma 51007
• DiI, NeuroDiO and DiD = Omega XF93, Chroma 61005
• DiB, NeuroDiO and DiI = Chroma 61000V2
| Dye | Abs | Em | Omega | Chroma |
| NeuroDiO （30021） | 484 | 501 | XF23 | 31001 or 41001 |
| DiI （30022） | 549 | 565 | XF32 | 31002 or 41002 |
| DiD （30023） | 644 | 665 | XF47 | 31023 or 41008 |
| DiB （30024） | 360 | 440 | XF03 | 31000V2 |
Spectral characteristics of DiI, DiO and DiD
流式細(xì)胞術(shù)Flow Cytometry
Cells labeled with DiI, NeuroDiO and DiD can be analyzed using the conventional FL2, FL1 and FL3 flow cytometer detection channels, respectively.
備注：Omega® filters are supplied by Omega Optical, Inc. （www.omegafilters.com）. Chroma filters are supplied by Chroma Technology Corp. （www.chroma.com）.
- DiI和DiO的熒光zui大激發(fā)與發(fā)射波長相差65 nm，因此兩者可組合進(jìn)行雙色標(biāo)記。DiO 的染色強(qiáng)度通常弱于DiI，在固定的組織中有時會*陰性。
- DiA為親脂性氨基苯乙烯基染料，常用于神經(jīng)元的示蹤。DiA 可與DiI 雙色標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞。在固定的組織中，當(dāng)DiO 染色失敗時使用DiA 可能會獲得良好的標(biāo)記效果。
- DiD是DiI 的類似物，其熒光激發(fā)和發(fā)射波長明顯紅移，該特性有利于避免自發(fā)熒光和光毒性作用，且使該染料適合雙色標(biāo)記。
- DiR的熒光zui大激發(fā)與發(fā)射波長處于近紅外區(qū)，許多組織在此區(qū)光學(xué)表現(xiàn)為透明。
產(chǎn)品選購：
| 貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 30021 | CellBriteTM Green Cytoplasmic Membrane-Labeling Kit | 1 mL |
| 30022 | CellBriteTM Orange Cytoplasmic Membrane-Labeling Kit | 1 mL |
| 30023 | CellBriteTM Red Cytoplasmic Membrane-Labeling Kit | 1 mL |
| 30024 | CellBriteTM Blue Cytoplasmic Membrane-Labeling Kit | 50次 |
References
1. J Cell Biol 103, 171 （1986）; 2. J Cell Biol 135, 63 （1996）; 3. Cytometry 21, 160 （1995）; 4. J Biol Chem 273, 33354 （1998）; 5. J Cell Biol 136, 1109 （1997）; 6. Anticancer Res 18, 4181 （1998）; 7. J Immunol Methods 156, 179 （1992）; 8. Methods Cell Biol 33, 469 （1990）; 9. US Patent 4,783,401.
