ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項
1. 加入反應(yīng)終止液后，沒有吸光值或吸光值偏低。
a.原因：未加入酶標記物。
解決辦法：請按照操作步驟進行。
b.原因：試劑盒內(nèi)容物未能充分回。
解決辦法：確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進行操作。
c.原因：室溫太低。
解決辦法：若室溫太低(<19℃)，請于操作步驟4，適當(dāng)延長溫育時間。
d.原因：未使用試劑盒的清洗液清洗。
解決辦法： 請用試劑盒內(nèi)所提供的清洗液清洗。
e.原因：試劑盒已過有效期限。
解決辦法：請更換成仍在有效期限內(nèi)的試劑盒。
2. 標準曲線線性不佳，或是平行性不好。
a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。
解決辦法： 請確認溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。
b.原因：操作時間拖太久。
解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。
c.原因：微孔間相互污染。
解決辦法： 加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。
d.原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。
解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。
e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。
解決辦法：加樣品或試劑時，吸頭請勿接觸微孔。
f.原因：洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。
解決辦法：請隨時監(jiān)控洗板機洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。
3. 吸光值均偏高(或線性不夠陡)。
a.原因：室溫太高(>25℃)。
解決辦法： 若無法降低室內(nèi)溫度，請適當(dāng)縮短步驟4的溫育時間。
b.原因：底物溶液受到污染。
解決辦法： 若發(fā)現(xiàn)底物溶液已呈現(xiàn)淡藍色，請不要再使用。
c.原因：反應(yīng)時間超過太久。
解決辦法：請控制反應(yīng)時間。
d.原因：酶標記物污染了盒內(nèi)其它試劑。
解決辦法：使用過的吸頭應(yīng)立即丟棄，可避免試劑間相互污染，凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應(yīng)立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡，再以清水沖洗干凈，可確保無殘留)
