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西安海研生物科技有限公司
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閱讀：49發(fā)布時間：2023-6-20
隨著國家對環(huán)境問題的日益重視，越來越多的檢測設(shè)備和技術(shù)應(yīng)用于水質(zhì)檢測中，其程控定量封口機檢測大腸菌群以操作簡便、檢測時間短、結(jié)果可靠而被廣泛應(yīng)用。那么，我們在使用程控定量封口機時應(yīng)注意哪些問題？下面我們一起看看。
采用酶底物法檢測水中糞大腸菌群是將已加入培養(yǎng)基的水樣混勻與97孔定量盤，置于44.5±0.5℃培養(yǎng)24h，糞大腸菌能在該溫度產(chǎn)生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)，分解選擇性培養(yǎng)基中的鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖(ONPG)生成黃色的鄰硝基，通過定量盤大小孔顯黃色數(shù)查詢酶底物法的MPN表，計算出糞大腸菌群的濃度。但是我們在操作的過程中需要特別注意以下幾點：
1、樣品稀釋的合理性
通過實驗發(fā)現(xiàn)，采用酶底物法檢測糞大腸菌群，水樣稀釋倍數(shù)越高，其測定的數(shù)值就越低，所以我們在日常檢測工作中，應(yīng)該根據(jù)具體的情況對水樣進行逐一做小倍數(shù)的稀釋，這樣即可以確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度，又可以提高數(shù)據(jù)的真實性。
2、樣品的均勻性
我們在每次取原液時，取樣的均勻度也會直接影響到后面的稀釋結(jié)果，所以說在每次取樣前需要充分搖勻，并盡快與培養(yǎng)基混合，否則會出現(xiàn)結(jié)果差異性很大，并且失去了該方法的穩(wěn)定性。
3、溫度培養(yǎng)的恒定性
使用酶底物法檢測糞大腸菌群時，培養(yǎng)溫度要按照要求設(shè)定，樣品在培養(yǎng)箱中于44.5℃培養(yǎng)，誤差控制在±0.5℃，溫度偏低或偏高都會直接影響到檢測結(jié)果。
4、培養(yǎng)時間的重要性
培養(yǎng)時間的長短也是會影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，我們通過大量實驗對比，發(fā)現(xiàn)使用酶底物法檢測糞大腸菌群培養(yǎng)16~24h的檢測結(jié)果與24h相比均有這明顯的差異，而培養(yǎng)22~28h與24h結(jié)果差異不顯著。因此，使用酶底物法檢測總大腸菌群的培養(yǎng)時間應(yīng)該在22~28h之間是可以得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
5、其他注意點：
（1）在使用該儀器時需要配合使用51孔/97孔定量檢測盤；
（2）檢測樣品/試劑混合液需要分配到獨立的孔中；
（3）51孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-200MPN值。
（4）97孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-2,419MPN值。
（5）整個檢測過程手工操作時間小于1分鐘。
以上就是為大家分享的關(guān)于程控定量封口機檢測大腸菌群時需要注意的事項，希望可以幫助到大家！
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