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多管發(fā)酵法與酶底物法的具體操作方法

閱讀:86發(fā)布時間:2023-5-23

多管發(fā)酵法與酶底物法的具體操作方法


多管發(fā)酵法
酶底物法
培養(yǎng)時間
48h
24h
準(zhǔn)備物品
乳糖蛋白胨培養(yǎng)基,EC培養(yǎng)基、試管、移液管、接種棒、以及其他常規(guī)實驗室儀器
海研試劑,定量盤,程控定量封口機
實驗室環(huán)境
實驗環(huán)境 培養(yǎng)基和器材均需滅菌 ,操作應(yīng)在無菌室或無菌操作臺進行
試劑和器材都是無菌的成品,操作可在非無菌環(huán)境中進行
操作步驟
初發(fā)酵:將待測試水樣用3個不同水樣量接種,每個水樣量要有5個管。其中,如接種體積為10mL或少于1mL,則可接種于普通濃度的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中。
培養(yǎng):接種后的水樣置于37±0.5℃培養(yǎng)24h
復(fù)發(fā)酵:初發(fā)酵陽性結(jié)果的發(fā)酵管,用接種棒將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到EC培養(yǎng)液中,于44.5±0.5℃培養(yǎng)24h
于100mL水樣中加入一份立科試劑,充分混勻,混合后倒入水樣在定量盤中用配套封口裝置封裝,于44.5±0.5℃培養(yǎng)24h
操作時長
低檢出個數(shù)
2個/100ml
1個/100ml



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