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杭州奧盛儀器有限公司
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更新時間:2025-07-22 09:14:27瀏覽次數(shù):1次
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Allsheng恒溫擴增PCR Master Mix(以RNA為模板)是一種即用型的恒溫擴增試劑盒,本試劑盒包含建立恒溫反應(yīng)體系(除引物和模板之外)的所有組分。本產(chǎn)品專為以RNA模板(如RNA病毒)的恒溫PCR檢測而設(shè)計。使用基因特異引物,逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)在一管內(nèi)完成,不需要額外開管/移液操作,大大提高了檢測通量,并降低了污染的風(fēng)險。
Allsheng恒溫擴增PCR Master Mix(以RNA為模板)是一種即用型的恒溫擴增試劑盒,本試劑盒包含建立恒溫反應(yīng)體系(除引物和模板之外)的所有組分。本產(chǎn)品專為以RNA模板(如RNA病毒)的恒溫PCR檢測而設(shè)計。使用基因特異引物,逆轉(zhuǎn)錄和PCR反應(yīng)在一管內(nèi)完成,不需要額外開管/移液操作,大大提高了檢測通量,并降低了污染的風(fēng)險。
交叉引物擴增技術(shù)(CPA)介紹
恒溫擴增技術(shù)是繼PCR技術(shù)后發(fā)展起來的一門新型的核酸擴增技術(shù)(Nucleic Acid Isothermal Amplification, NAIA),其擴增反應(yīng)的全過程均在同一溫度下進行。
與傳統(tǒng)PCR技術(shù)相比,使得他們對擴增所需儀器的要求大大簡化,反應(yīng)時間大大縮短,因而具有巨大的應(yīng)用價值,成為分子診斷行業(yè)發(fā)展的熱點。
CPA擴增主要包含以下幾個步驟:
1. 交叉正向引物CPF中的PFs與模板DNA中PFa互補,啟動DNA合成,使得PRa被引入到所擴增的產(chǎn)物中;
2. 外圍引物DP1s與PFa前端DP1a序列互補,通過鏈置換型DNA聚合酶向前延伸,一邊置換CPF合成的能與CPR和DP2a結(jié)合的單鏈產(chǎn)物(結(jié)構(gòu)3),一邊與模板DNA形成雙鏈產(chǎn)物(結(jié)構(gòu)2);
3. 在結(jié)構(gòu)3中,DP2a通過鏈置換型DNA聚合酶向前延伸,置換出由CPR所延伸的單鏈產(chǎn)物(結(jié)構(gòu)5),同時合成與步驟2中由CPF延伸所產(chǎn)生單鏈DNA形成雙鏈產(chǎn)物(結(jié)構(gòu)4),而結(jié)構(gòu)5相對起始的DNA模板,多了PRs和PFs兩個片段序列;
4. 單鏈結(jié)構(gòu)5中的3’端的PFa和PRs可分別與CPF中的PFs和CPR中的PRa互補結(jié)合, 可在鏈置換型DNA聚合酶的作用下延伸和置換出相應(yīng)的單鏈產(chǎn)物。延伸產(chǎn)物相對結(jié)構(gòu)5來說又增加了一個PFs區(qū)域(結(jié)構(gòu)8);
5. 因此,擴增引物CPF和CPR的不斷雜交和延伸,不僅使得結(jié)構(gòu)5的長度不斷的加長,從而引入更多CPF和CPR 3’端互補區(qū)域,同時也置換出了各種可與CPF和CPR 3’端互補的單鏈產(chǎn)物;
6. 通過CPF和CPR的不斷雜交延伸和DNA聚合酶的鏈置換作用,使得DNA拷貝數(shù)不斷的增加,從而達到基因擴增的效果。
應(yīng)用
這種新型的核酸恒溫擴增方法,其廣泛應(yīng)用于RNA病毒的快速檢測。
特點
逆轉(zhuǎn)錄和擴增在同一管內(nèi)進行,避免污染。靈敏度高,反應(yīng)設(shè)備及檢測設(shè)備價格低廉等廣受科研工作者的親睞,是未來檢測技術(shù)發(fā)展的趨勢。
使用說明
請詳見說明書
訂貨號 | 產(chǎn)品描述 |
RS-IA0201-24T | Allsheng® 恒溫擴增PCR Master Mix(RNA模板) 24次 |
RS-IA0201-48T | Allsheng® 恒溫擴增PCR Master Mix(RNA模板) 48次 |
RS-IA0201-96T | Allsheng® 恒溫擴增PCR Master Mix(RNA模板) 96次 |
RS-FD0201-24T | Allsheng® 恒溫擴增PCR Master Mix(RNA模板、凍干粉)24次 |
RS-FD0201-48T | Allsheng® 恒溫擴增PCR Master Mix(RNA模板、凍干粉)48次 |
RS-FD0201-96T | Allsheng® 恒溫擴增PCR Master Mix(RNA模板、凍干粉)96次 |
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