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技術(shù)文章

熒光染料簡(jiǎn)易指南

閱讀：80發(fā)布時(shí)間：2022-3-28

　　熒光染料(或稱(chēng)熒光素)常用作細(xì)胞成像和流式細(xì)胞術(shù)等多種應(yīng)用的檢測(cè)試劑。熒光染料可吸收特定波長(zhǎng)的光能，然后以更長(zhǎng)的波長(zhǎng)重新發(fā)射光能。熒光染料吸收和發(fā)射光的波長(zhǎng)分別構(gòu)成熒光染料的激發(fā)和發(fā)射光譜(或簡(jiǎn)稱(chēng)為熒光染料光譜)。

　　流式細(xì)胞儀或其它需要使用熒光染料的儀器配備有激光器，激光器能產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光，從而激發(fā)能吸收該特定波長(zhǎng)的光的熒光染料。然后該熒光染料發(fā)射的光通過(guò)濾光鏡，因此每個(gè)傳感器只能檢測(cè)到一定范圍內(nèi)的被濾光鏡濾過(guò)的熒光。所檢測(cè)的熒光即為儀器所識(shí)別的信號(hào)。

　　目前已研發(fā)了許多不同的熒光染料，每種都具有特定的發(fā)射和激發(fā)光譜?，F(xiàn)在，在整個(gè)可見(jiàn)光譜范圍(包括紅外區(qū)域)內(nèi)可以吸收并發(fā)射特定波長(zhǎng)的光的熒光染料都已經(jīng)商品化。此外，熒光染料發(fā)射光的強(qiáng)度也有區(qū)別。熒光染料的亮度取決于其吸收光的能力和吸收光轉(zhuǎn)化為發(fā)射光的效率。

　　如果不借助合適的工具，選擇適用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的熒光染料可能比較困難。如果所設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)為需要兩種或更多種熒光染料的多色實(shí)驗(yàn)時(shí)，選擇熒光染料將變得更加困難。在多色實(shí)驗(yàn)中，必須注意熒光染料之間的光譜重疊以及其它因素，才能盡量減少可能出現(xiàn)的問(wèn)題，例如熒光溢出。

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