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嚙齒類動物顯性致死試驗儀
2025-4-28 閱讀(95)
嚙齒類動物顯性致死試驗儀
一、 儀器介紹
實驗目的：
本試驗是一項生殖細胞致突變試驗,用來檢測受試物對整體哺乳動物生殖細胞的遺傳損傷,進一步確證體外試驗或其他試驗系統(tǒng)獲得的陽性結果,以評價受試物能否引起顯性致死突變。
實驗概述：
哺乳動物發(fā)育中的精子在物理或化學因素作用下,發(fā)生染色體損傷,從而使受精卵在發(fā)育中死亡引起顯性致死的染色體損傷主要為染色體斷裂。顯性致死的主要表現是受精卵著床前丟失或著床后胚
胎早期死亡。通過適當的途徑使雄性動物接觸受試物,然后與未經染毒且未交配過的雌性動物交配,交配結束后,取出雌性動物。雌性動物于妊娠后半期處死,剖開腹腔,取出子宮,檢査兩側子宮內的胚胎植入數(著床數)、早死胎、晚死胎和活胎數。雄性動物每間隔一定時間再與另一批未經染毒且未交配過的雌性動物交配,如此共進行數批,以保證覆蓋一個精子周期。
應用范圍
應用于科研、農業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域
二、試驗流程
1）實驗動物：
物種: 通常選用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠(如SD大鼠、CD-1小鼠)
數量: 每組至少15只雄鼠，設多個劑量組和陰性/陽性對照組。
雌鼠: 需未交配過的健康雌鼠，用于與雄鼠交配。
2）給藥劑量分組:
至少設3個劑量組，高劑量應出現輕微毒性(如體重減輕)。
陰性對照組如體重減輕(溶劑對照)和陽性對照組
給藥方式:通常為經口灌胃，連續(xù)給藥5~7天(覆蓋精子發(fā)生周期不同階段)
3）交配程序
交配安排:雄鼠給藥后，按周次與未處理雌鼠交配(每周更換一批雌鼠，共5~6批)，以覆蓋精子發(fā)生全周期(精原細胞一精子)。
交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰栓(交配證據)
4）觀察指標：
胚胎存活分析
雌鼠妊娠中期解剖，計數黃體數、著床數、活胎數和死胎數。
計算顯性致死率:
其他指標: 雄鼠體重、睪丸重量、精子質量等,
5）結果評價：
陽性結果:顯性致死率顯著升高(如劑量依賴性增加，或某批交配周期異常)，提示受試農藥可能誘發(fā)生殖細胞遺傳損傷。
陰性結果:需結合其他遺傳毒性試驗綜合評估，
