目的
1．學(xué)習(xí)并掌握細(xì)菌生長曲線的特點及其測定的原理，從而了解微生物在一定條件下生長、
繁殖的規(guī)律。
2．學(xué)習(xí)并掌握由生長曲線計算微生物代時的方法。
原理
生長曲線就是將一定量的單細(xì)胞微生物接種在適合的新鮮液體培養(yǎng)基中，在適宜溫度條件下進(jìn)行培養(yǎng)，然后以菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標(biāo)，以生長時間為橫坐標(biāo)，得到的曲線即是，如圖20-1 所示。生長曲線一般分為延遲期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期四個時期。不同的微生物具有不同的生長曲線，同一微生物在不同條件下培養(yǎng)也會得到不同的生長曲線。生長曲線的測定包括血球計數(shù)法、平板菌落計數(shù)法、稱重法及比濁法等多種。本實驗采用比濁法測定。因為細(xì)菌懸液的濃度與渾濁度成正比，所以可利用光電比色計測定菌懸液的光密度來推知菌液的濃度，并將所測得的光密度值（OD 值）與其對應(yīng)的培養(yǎng)時間作圖，即可繪出該菌在一定條件下的生長曲線（本試驗采用半對數(shù)坐標(biāo)紙繪圖）。在曲線上對數(shù)生長期范圍內(nèi)，任取兩個成倍的OD 值，其相對應(yīng)的時間差即為該菌代時G。
材料
1．菌種：大腸桿菌（Escherichia coli）
2．培養(yǎng)基：250ml 三角瓶分裝100ml，18×180mm 試管分裝5ml LB 培養(yǎng)液。
3．滅菌物品：18×180mm 試管，10ml 吸管。
4．儀器：722 分光光度計，恒溫?fù)u床。
5．其它：廢液缸，擦鏡紙，吸水紙，蒸餾水。
方法
1．種子液的培養(yǎng)：將大腸桿菌接入LB 培養(yǎng)液試管過夜培養(yǎng)至OD600 值為1。
2．接種：以無菌操作方式向100ml LB 培養(yǎng)液中加入10ml OD600 值為1 的大腸桿菌菌懸液，此時培養(yǎng)液OD600 值為0.1，并記錄為“0”時。
3．培養(yǎng)與測定：將接種后的培養(yǎng)液置于37℃下振蕩培養(yǎng)，定時取樣，每次均取5ml，然后以無菌培養(yǎng)液為對照，在722 光柵分光光度計上，測定OD600 值，并記錄。
