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產(chǎn)品及特點 組織胞漿菌(Histoplasm spp)會引起組織胞漿菌病，是一種在世界范圍內(nèi)
廣泛流行的傳染病，尤其是以嬰幼兒和老年人多見，男性發(fā)病率高于女性，臨
床表現(xiàn)有原發(fā)性肺部感染、播散性感染等，原發(fā)性肺部感染常表現(xiàn)為發(fā)熱、頭
疼、全身不適和干咳，嚴重者會出現(xiàn)低氧血癥和呼吸衰竭，播散性感染常有發(fā)
熱、體重下降、全身不適、肝脾腫大等癥狀，罕有伴發(fā)肺病變等癥狀，該細菌
的感染對人體健康造成嚴重損害，因此快速檢測組織胞漿菌通用具有重要意義。
本試劑盒根據(jù)熒光定量 PCR 原理開發(fā)，它具有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供細菌 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增組織胞漿菌通用。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。 規(guī)格及成分 成 份 編號 十孔盒包裝
PCR MagicMix 3.0 90805 1 mL（亮黃蓋）
超純水 100935 1 mL（藍色）
組織胞漿菌通用 PCR 引物混合
液
13-78400yw 100 μL（白蓋）
組織胞漿菌通用 PCR 陽性對照 13-78400pc 100 μL（黃蓋）
天凈沙 DNA 釋放劑試用裝 130982 50 次（試用裝）
使用手冊 13-78400sc 1 份
運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置，不要污染其
他試劑。 自備試劑 樣品 DNA。 使用方法 一、樣品 DNA 的制備
1. 如果有 N 個樣品，必須設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性
對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）。可以用 10μL 陽性對照的 10000
倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作
為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)細菌 DNA 提取試劑
盒兼容。也可以選購本公司的細菌 DNAout 或柱式細菌 DNAout。本試劑盒
免費贈送 50 次免 DNA 提取的天凈沙 DNA 釋放劑，本產(chǎn)品的裂解液可以直接
作為 PCR 模板，省略了 DNA 提取步驟。其使用手冊可從本公司網(wǎng)站。
二、設(shè)置 PCR 反應（40 μL 體系）
3. 對 N+2 個樣品，在 PCR 時需要增加一個 PCR 陽性對照和一個 PCR 陰性對照，
故需要設(shè)置 N+4 個反應。在 N+4 個 PCR 管中分別加入下列成分：
成分
N+2 個
樣品管
PCR 陰性
對照
PCR 陽性
對照
PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL
組織胞漿菌通用 PCR 引物
混合液
各 2 μL 2 μL 2 μL
N+2 個樣品 DNA 模板 各 18 μL - - 樣品制備陰性對照 - 18 μL - 樣品制備陽性對照 - - 18 μL
4. 按下表設(shè)置 PCR 反應：
過程 溫度 時間
預變性 94℃ 5 min
PCR 反應
（35 個循環(huán)）
94℃ 20 sec
50℃ 20 sec
72℃ 30 sec
后延伸 72℃ 10 min
三、電泳檢測
5. 取 10-20 μL PCR 產(chǎn)物。電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。本產(chǎn)品提供的 PCR Mix 在擴
增結(jié)束后可以直接上樣，不需要另外再加 loading buffer。預期的 PCR 產(chǎn)
物長度為 208bp。陽性對照必須有此條帶出現(xiàn)，陰性對照必須無任何擴增，
否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品，可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以
排除 PCR 抑制劑的感染。 關(guān)聯(lián)產(chǎn)品 組織胞漿菌通用可視化 LAMP 擴增試劑盒