| 上海宇淳生物科技有限公司
主營產(chǎn)品： PCR八聯(lián)排管,sigma現(xiàn)貨,Cy7試劑 |
公司信息
| 參考價 | ￥1020 |
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型號
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品牌
其他品牌 -
廠商性質(zhì)
經(jīng)銷商 -
所在地
上海市
| 48T | 1020元 | 1 盒 可售 |
更新時間：2024-05-23 14:45:19瀏覽次數(shù)：349
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土壤半纖維素酶/土壤木聚糖酶試劑盒,微板法
土壤半纖維素酶/土壤木聚糖酶試劑盒,微板法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤半纖維素酶/土壤木聚糖酶試劑盒說明書 （貨號：WS6230W 微板法 48 樣） 一、產(chǎn)品簡介： 半纖維素酶主要檢測木聚糖酶活力，是將木聚糖降解成低聚糖和木糖的一組酶的總 稱，廣泛應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中。 土壤半纖維素酶在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，進(jìn)一步在沸水浴 條件下與 3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng)，在 540nm 處有特征吸收峰，反應(yīng)液顏色的 深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應(yīng)液在 540nm 吸光值增加速率，即可 計算該酶活力大小。 二、試劑盒組分與配制： 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 100mL×1 瓶 4℃保存 試劑二 液體 15mL×1 瓶 4℃保存 試劑三 液體 20mL×1 瓶 4℃保存 標(biāo)準(zhǔn)品 粉劑×1 支 4℃保存 若重新做標(biāo)曲，則用到該試劑 三、所需的儀器和用品： 酶標(biāo)儀、96 孔板、可調(diào)式移液器、天平、常溫離心機(jī)、空氣?。ê銣卣鹗巸x）、水浴鍋。 四、土壤半纖維素酶活性測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本制備： 取新鮮土樣或干土（風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干），先粗研磨，過 40 目篩網(wǎng)備用。 【注】：土壤風(fēng)干，減少土壤中水分對于實驗的干擾；土壤過篩，保證取樣的均勻細(xì)膩； 2、上機(jī)檢測： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 540nm。 ② 在 EP 管中依次加入： 試劑名稱（μL） 測定管 對照管 土樣（g） 0.3 0.3 試劑一 600 900 試劑二 300 充分混勻，40℃培養(yǎng) 6 小時（振蕩培養(yǎng)或間隔一段時間手動振蕩 混勻幾下），12000rpm，25℃離心 10min，上清液待用 ③ 顯色反應(yīng)，在 EP 管中依次加入： 上清液 40 40 試劑三 200 200 混勻，沸水?。?/span>95-100℃，可用封口膜纏緊，防止水分流失）5min 后，冷卻至室溫。 蒸餾水 800 800 混勻，若渾濁則 8000rpm 室溫離心 5min，取 200μL 液體至 96 孔板中，于 540nm 處讀取吸光值 A，△A=A 測定管-A 空白管。 【注】：1.若ΔA 較小，可延長 40℃的孵育時間 T（如 24 小時或更長），或增加土樣質(zhì)量 W， 或增加③歩顯色反應(yīng)步驟中的上清液 V1（如由 40μL 增至 240μL 或更多，則蒸餾 水相應(yīng)減少）。則改變后的 T 和 W 和 V1 需代入計算公式重新計算。本試劑盒僅供科研使用 2 2.若測定管 A 值大于 1.5 或△A 大于 1，③歩顯色反應(yīng)步驟中的上清液可用蒸餾水稀釋， 則稀釋倍數(shù) D 代入公式計算。 五、結(jié)果計算： 1、標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：y=7.5568x+0.0007，x 是標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量（mg），y 是△A。 2、酶活定義：PH4.8 條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生 1mg 還原糖所需的酶量為 一個酶活單位。 土壤半纖維素酶活力(mg/d/g 土樣)=[(△A-0.0007)÷7.5568]×(V2÷V1)÷W÷T×D =12×(△A-0.0007)÷W×D V1---顯色反應(yīng)中上清液體積，40μL=0.04mL； V2---反應(yīng)總體積，900μL=0.9mL； T---反應(yīng)時間，1/4d； W---土壤樣本質(zhì)量，g； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1。 附：標(biāo)準(zhǔn)曲線制作過程： 1 制備標(biāo)準(zhǔn)品母液（5mg/mL）：向標(biāo)準(zhǔn)品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水（母液需在兩天 內(nèi)用且-20℃保存）。 2 把母液稀釋成六個濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品：0, 1, 2, 3, 4, 5. mg/mL。也可根據(jù)實際樣本來 調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)品濃度。 3 在顯色反應(yīng)階段，按照測定管加樣表操作，依據(jù)結(jié)果即可制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
