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土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-Lip)試劑盒,微板法
土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-Lip)試劑盒,微板法
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【簡單介紹】
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土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-Lip)試劑盒,微板法
木質(zhì)素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系,在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。

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本試劑盒僅供科研使用 土壤木質(zhì)素過氧化物酶(Soil lignin peroxidase,S-Lip)試劑盒說明書 (貨號(hào):WS1330W 微板法 48 樣) 一、產(chǎn)品簡介: 木質(zhì)素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解 酶系,在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制 等方面具有較大的應(yīng)用潛力。 土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-LiP)氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,藜蘆醛在 310nm 處有特征吸 收峰。通過測定 310nm 處的藜蘆醛的增加速率,即可得到 S-LiP 酶活性大小。 二、試劑盒組分與配制: 試劑名稱 規(guī)格 保存要求 備注 試劑一 液體 10mL×1 4℃保存 試劑二 液體μL×1 4℃保存 臨用前用前甩幾下使液體落入底部,再 8.73mL 蒸餾水混勻備用。 試劑三 液體μL×1 4℃保存 臨用前用前甩幾下使液體落入底部,取 2 個(gè)新的 EP 管,每管取 3.3μL 液體,再 2mL 蒸餾水混勻備用。 三、所需的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、96 孔板(UV 板)、天平、低溫離心機(jī)、天平、空氣浴/恒溫震蕩培養(yǎng)箱、甲苯。 四、土壤木質(zhì)素過氧化物酶(S-Lip)活性測定: 建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn) 樣本和試劑浪費(fèi)! 1、樣本制備: 取新鮮土樣風(fēng)干或者 37 度烘箱風(fēng)干,先粗研磨,過 40 目篩備用。 【注】:土壤風(fēng)干,減少土壤中水分對(duì)于實(shí)驗(yàn)的干擾;土壤過篩,保證取樣的均勻細(xì)膩; 2、上機(jī)檢測: 1 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 310nm。 2 所有試劑至常溫(25℃)狀態(tài)。 3 EP 管中依次加入: 試劑名稱(μL測定管 對(duì)照管 土樣(g0.1 0.1 甲苯 30 30 25℃靜置 15min 試劑一 200 蒸餾水 200 試劑二 60 60 試劑三 40 40 30℃震蕩(空氣?。┓磻?yīng) 3h12000rpm,4℃離心 10min,取上清 200μL 移至 96 孔板中,于 310nm 處讀取吸光值 AA=A 測定- A 對(duì)照(每個(gè)樣本做一個(gè)自身對(duì)照)。 【注】若A 值較低,可加大土壤樣本量或者延長反應(yīng)時(shí)間,則改變后的樣本質(zhì)量 W 和反應(yīng)時(shí)間 T 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。本試劑盒僅供科研使用 2 五、結(jié)果計(jì)算: 酶活性定義:每克土壤每天氧化 1nmol 藜蘆醇生成藜蘆醛所需的酶量為一個(gè)酶活力單位。 S-LiP 活性(nmol/d /g 土樣)=(A÷ε÷d)×109×V÷W÷T=567.7×A÷W ε---藜蘆醛摩爾消光系數(shù):9300L/mol/cmd---比色皿光徑,0.5cm; V---反應(yīng)總體積,0.33mL=0.33×10-3L; W---樣本質(zhì)量,g; T---反應(yīng)時(shí)間,3h=1/8d



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