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上海美軒生物科技有限公司
參 考 價 | 面議 |
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所 在 地上海
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更新時間:2018-10-24 11:28:14瀏覽次數(shù):476次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術標本中建立的。 細胞群體倍增時間為20小時。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結節(jié)。 細胞形態(tài)呈上皮樣細胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維,與臨床肝癌細胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時,其有絲分裂指數(shù)約為7%。 BEL-7402細胞的染色體數(shù)為不足三倍體,有一個異常的近端著絲點染色體。
形態(tài)特性 | 上皮細胞樣 | ||
生長特性 | 貼壁生長 | ||
特征特性 | BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術標本中建立的。 細胞群體倍增時間為20小時。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結節(jié)。 細胞形態(tài)呈上皮樣細胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維,與臨床肝癌細胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時,其有絲分裂指數(shù)約為7%。 BEL-7402細胞的染色體數(shù)為不足三倍體,有一個異常的近端著絲點染色體。 間接免疫熒光法測BEL-7402細胞內(nèi)的AFP為陽性反應。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細胞不同,而與人胚肝及臨床肝癌相近。 | ||
培養(yǎng)條件 | RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,10% | ||
傳代方法 | 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 | ||
傳代情況 | PN | ||
凍存條件 | 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS |
安全性:所有腫瘤和病毒轉染的細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細胞后,在倒置鏡下(4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟操作如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項:
1、觀察細胞要在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。
2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
4、收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時與我們。
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