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ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒

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產(chǎn)品簡介

ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒 ATP生物發(fā)光技術(shù)的原理是熒光素酶（Luciferase）以熒光素（Luciferin）、三磷酸腺苷（ATP）和O2為底物，在Mg2＋存在時(shí)，能將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。ATP既是熒光素酶催化發(fā)光的必需底物，又是所有生物生命活動(dòng)的能量來源。在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強(qiáng)度呈線性關(guān)系。研究表明，各生長期的細(xì)菌均有較恒定水平的ATP含量

詳細(xì)介紹

ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒

名稱	規(guī)格	價(jià)格	手冊(cè)
ATP發(fā)光法細(xì)胞活力檢測試劑盒	200次	詢價(jià)

ATP生物發(fā)光技術(shù)的原理是熒光素酶（Luciferase）以熒光素（Luciferin）、三磷酸腺苷（ATP）和O2為底物，在Mg2＋存在時(shí)，能將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能。ATP既是熒光素酶催化發(fā)光的必需底物，又是所有生物生命活動(dòng)的能量來源。在熒光素酶催化的發(fā)光反應(yīng)中，ATP在一定的濃度范圍內(nèi)，其濃度與發(fā)光強(qiáng)度呈線性關(guān)系。研究表明，各生長期的細(xì)菌均有較恒定水平的ATP含量，因此，提取細(xì)菌的ATP，利用生物發(fā)光法測出ATP含量后，即可推算出樣品中的含菌量，整個(gè)過程僅為十幾分鐘。由于生物發(fā)光法無需培養(yǎng)微生物過程，操作簡便、靈敏度高，在短時(shí)間內(nèi)即可得到檢測結(jié)果，具有其他微生物檢測方法*的優(yōu)勢，是目前檢測微生物快的方法之一。
本試劑盒采用生物發(fā)光（bioluminescent）法，利用Firefly luciferase（螢火蟲熒光素酶）催化底物L(fēng)uciferin（熒光素）的轉(zhuǎn)化，高效利用ATP的能量，發(fā)射出光子。發(fā)光信號(hào)與存在的ATP量呈正比，而ATP與存在于培養(yǎng)基中的細(xì)胞數(shù)目直接呈正比。ATP的檢測靈敏度達(dá)到10-13 mol，故具有*的敏感性。本試劑盒采用優(yōu)化的酶反應(yīng)體系，使發(fā)光反應(yīng)持續(xù)數(shù)十分鐘，便于手工操作多個(gè)樣品。操作簡便，可快速獲得結(jié)果。該產(chǎn)品特點(diǎn)如下：
1. 高度敏感：靈敏度達(dá)到10-13 mol
2. 快速簡便：加入制劑后迅速獲得結(jié)果
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時(shí)，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進(jìn)入水相，離心后可形成水相層和有機(jī)層，這樣RNA與仍留在有機(jī)相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機(jī)層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實(shí)驗(yàn)步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴(kuò)增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴(kuò)增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進(jìn)行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進(jìn)行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達(dá)到分離目的。在pH高達(dá)12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價(jià)閉合環(huán)狀的兩條互補(bǔ)鏈不會(huì)*分離，當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
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