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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-12-05 09:55:52瀏覽次數(shù):172
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操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱:人肺癌細(xì)胞株:MSTO-211H
貨號:BJ-X96482
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
分類:細(xì)胞系
商品介紹:
名稱 MSTO-211H (人肺癌細(xì)胞株) 種屬 人類 年齡(性別) 男性,62歲 組織來源 二相間皮瘤肺轉(zhuǎn)移灶 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣 背景描述 MSTO-211H細(xì)胞是于1985年從一位肺二相間皮瘤患者的胸水中建株的,這個(gè)病人接受過多種藥物聯(lián)合前期。MSTO-211H細(xì)胞具有高親和力的EGF結(jié)合位點(diǎn),并表達(dá)神經(jīng)元特異性烯醇酶(NSE)及人絨毛膜(HCG)的α與β亞基;未檢測到胺脫羧酶(DDC)、邦巴辛與神經(jīng)Tensin。MSTO-211H細(xì)胞過表達(dá)c-myc原癌基因,并沒有觀察到基因重排或擴(kuò)增。MSTO-211H細(xì)胞V-src、v-abl、v-erbB、c-raf1、Ha-ras、Ki-ras和N-ras的表達(dá)呈陽性;未檢測到N-myc、L-myc、c-myb、c-fos、v-fes、v-fms和v-sis癌基因的表達(dá)。MSTO-211H細(xì)胞的飽和濃度能達(dá)到4×10^5/cm^2,但達(dá)到這個(gè)濃度時(shí)就會(huì)從表面脫落。 生物安全等級 1 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時(shí)間 ~30-40小時(shí) 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 致瘤性 Yes, tumors for med in approximately 20% of nude mice inoculated with MSTO-211H cells. 保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2081 DSMZ; ACC-390 |
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:產(chǎn)品僅用于科研
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蒼白芽孢桿菌 細(xì)黃鏈霉菌
白色念珠菌凍干粉 肺炎克雷伯菌凍干粉
銅綠假單胞菌 費(fèi)氏志賀氏菌
大腸埃希氏菌(大腸桿菌) 解淀粉芽孢桿菌
尖鱗黃傘 凸形假單胞桿菌
脂酰肌醇激酶
骨形態(tài)發(fā)生蛋白4
蛋白酸酯酶-1
骨成型蛋白受體1A
D型-過氧化酶活化增生受體
人肺癌細(xì)胞株:MSTO-211H大鼠金屬硫蛋白3(MT3)elisa檢測試劑盒
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